[发明专利]一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用

权利要求书

1.一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，以CILE为基底电极，通过电还原法在其表面生成还原氧化石墨烯薄膜，所述的还原氧化石墨烯上进一步修饰羧基化多壁碳纳米管，羧基化多壁碳纳米管上进一步负载金纳米粒子，所述金纳米粒子用于巯基化适配体探针的自组装，所述巯基化适配体探针用于特异性识别重金属铅离子。

2.根据权利要求1所述的一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，所述的适配体传感器构建过程中电还原使用的氧化石墨烯分散液浓度为0.5~3.0 mg/mL，电还原时间为50~300 s。

3.根据权利要求1所述的一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，所述的适配体传感器构建过程中使用的羧基化多壁碳纳米管分散液浓度为0.5~2.0 mg/mL，用量为6.0~10.0 μL。

4.根据权利要求1所述的一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，所述的适配体传感器构建过程中电沉积使用的氯金酸溶液浓度为0.5~3.0 mmol/L，电沉积时间为50~200 s。

5.根据权利要求1所述的一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，所述的适配体传感器构建过程中使用的巯基化适配体探针序列为5’-SHC₆ GGG TGG GTG GGT GGG T-3’，浓度为1.0~10.0 μmol/L。

6.一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，具体包括如下步骤：

（1）将10.0 µL 0.5 mg/mL氧化石墨烯分散液均匀涂布在CILE表面，室温晾干后放入10.0 mmol/L pH = 7.7 Tris-HCl缓冲溶液中进行电化学还原，还原电位-1.3 V，时间为200 s，用超纯水洗涤自然晾干后即可得到rGO/CILE；

（2）将COOH-MWCNT加入到分散剂N’N-二甲基甲酰胺中进行超声分散均匀，得到COOH-MWCNT分散液，取8.0 µL 2.0 mg/mL该分散液均匀涂布在步骤（1）所得的rGO/CILE表面，室温晾干即可得到COOH-MWCNT/rGO/CILE；

（3）将步骤（2）所得的COOH-MWCNT/rGO/CILE放入2.0 mmol/L 氯金酸溶液中进行电化学沉积，沉积电位-0.3 V，时间为100 s，用超纯水洗涤自然晾干后即可得到Au/COOH-MWCNT/rGO/CILE；

（4）将步骤（3）制备好的Au/COOH-MWCNT/rGO/CILE置于1.0 μmol/L巯基化适配体探针中于4 °C下自组装12 h，通过形成Au-S键将巯基化适配体探针固定在修饰电极上，取出后用超纯水冲洗，除去吸附在电极表面未组装的适配体链；进一步滴涂30.0 μL 1.0 mmol/L硫代乙醇酸，室温25 °C下反应0.5 h，封闭电极表面空余的结合位点，用超纯水洗涤自然晾干后即可得到适配体传感器（Aptamer/Au/COOH-MWCNT/rGO/CILE）。

7.一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，适配体传感器在分析应用过程中，巯基化适配体探针与不同浓度铅离子反应时间为40~60min。

8.一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，适配体传感器在分析应用过程中，铅离子诱导形成的G-四链体构象与Hemin的结合时间为10~60 min，Hemin分散液的浓度为1.0~10.0 μmol/L。

9.一种用于铅离子检测的电化学适配体传感器件的构建与分析应用，其特征在于，适配体传感器在分析应用过程中，电化学检测Hemin电信号时所使用的电解液为10.0~50.0mmol/L Tris-HCl缓冲液，缓冲液pH为7.1~9.0。