[发明专利]一种棉花转化事件KJC003及其应用

说明书

本申请公开了一种棉花转化事件KJC003，其特征在于，特征基因序列包含转基因表达盒，所述转基因表达盒的核苷酸序列为SEQ ID NO:9。本发明还提供了用于检测棉花转化事件KJC003的引物对，以及检测方法。本发明的转化事件KJC003的棉花能够同时耐受草甘膦和抵抗鳞翅目害虫的侵染，且结铃、吐絮均不受影响，有利于控制田间杂草，田间害虫，同时提高耕作效率和产量。

技术领域

本申请本发明涉及植物生物技术领域，主要涉及一种用于棉花抗草甘膦和抗鳞翅目害虫的转化事件KJC003及其在棉花育种中的应用。

背景技术

棉花(陆地棉)在世界上许多地区是重要的经济作物，为了生产具有所需性状的棉花，已将生物技术方法应用于这种作物。一种此类所需性状是除草剂耐受性，一种此类所需性状是抗虫性。除草剂耐受性转基因在植物中的表达能够赋予植物所需的除草剂耐受性状，抗虫性转基因在植物中的表达课赋予植物所需的抗虫性状。许多不同的因素影响转基因的表达，但是转基因的表达可能受到转基因插入的染色体位置和基因组结果的影响。例如，已经在植物中观察到，在转基因的染色体插入位点方面不同但在其他方面都相同的单个事件之间，通常存在着转基因表达水平和模式的变异。在事件之间还可能存在不想要的和/或想要的表型或农学差异。因此，为了选择具有所需性状和使其适合于商业化目的所需的最适表型和农业特性两者的事件，通常需要产生并分析大量单个植物转化事件。这样的选择通常需要经过多年、在多个地点并在多种不同条件下对许多事件进行温室和田间试验，以便可以收集到大量农艺学、表型和分子数据。然后必须由科学家和农学家对得到的数据进行分析，其目的是选择商业上适合的事件。这样的事件一旦被选择，随后可能用于使用植物育种方法将所需性状渗入到其他遗传背景中，并由此产生含有所需性状并适当地适应于特定当地生长条件的大量不同作物品种，这些作物品种含有所需性状并且适当的适应特定的当地农艺条件。

发明内容

在研究过程中，申请人发现了一个可使棉花获得抗草甘膦性状和抗虫(鳞翅目)的转基因表达盒，转基因的棉花植株在高剂量草甘膦和鳞翅目害虫的侵染的情况下仍正常生长。

本发明的一个方面在于提供一种棉花抗草甘膦和抗虫转化事件 KJC003，其特征基因序列包含转基因表达盒，所述转基因表达盒的核苷酸序列为SEQ ID NO:9。

在根据本发明的一个实施方案中，所述特征基因序列还包含5'端连接序列，所述5'连接序列选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5或 SEQ ID NO:7中的任一个。

在根据本发明的一个实施方案中,所述特征基因序列还包含3'端连接序列，所述3'端连接序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6和 SEQ ID NO:8中的任一个。

在根据本发明的一个实施方案中，所述特征基因序列为核苷酸序列为SEQ ID NO:10的基因序列或其互补序列。

在根据本发明的一个实施方案中，所述特征序列位于四倍体棉花的 D基因组第8组染色体上。

本发明的另一方面在于提供用于检测上述的棉花转化事件KJC003的引物对，所述引物对包含特异性识别侧翼序列的第一引物对和/或第二引物对，所述第一引物对由SEQID NO:11和SEQ ID NO:12(P681：5’- CCAGAATCCTTGTCAGATT-3’和D08-3242F：5’-TACGGCTTATCACCCTCA-3’) 组成；所述第二引物对由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14组成。FMV1：5’ -ATAAAGGCAAAGATGCTTTTGGTAGGTG-3’和D08-277R：5’- TTTCCTTGTGGTCAGTTT-3’。