[发明专利]一种特异性检测次氯酸的近红外荧光探针的应用

说明书

一种特异性检测次氯酸的近红外荧光探针的应用，所述荧光探针的结构如式I所示。本发明提供的荧光探针，可对次氯酸给出特异性的荧光信号响应，不受其他活性氧物种干扰。此外，本发明提供的荧光探针制备方法简便，性质稳定，可批量生产，在食品、环境、生物医药等领域中有着良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种特异性检测次氯酸的近红外荧光探针的应用，属于生化分析技术领域。

背景技术

次氯酸是生物体内最重要的活性氧物种(ROS)之一，由过氧化氢和氯离子在髓过氧化物酶的催化产生，在生物体内扮演着“双刃剑”的角色。一方面，次氯酸具有强氧化性、亲核性，在细菌等病原体入侵细胞时产生，从而杀死入侵的病原体，在生物体的天然防御起着积极的作用，并且还可以参与细胞的内部微环境氧化还原平衡的调控；另一方面，次氯酸水平的异常变化会破坏蛋白质等关键生物大分子，引起细胞凋亡、组织损伤等，进而导致疾病的发生。研究发现，心血管疾病、神经退行性疾病、关节炎以及癌症等重大疾病与次氯酸水平的异常升高密切相关。因此，开发简便、可靠、准确的机体内次氯酸水平的检测方法具有重要意义。近红外荧光成像技术，具有组织穿透能力强、对生物样品光损伤小等特点，能动态标记特定组织及病理状态下次氯酸在细胞内的时空分布，实现活细胞、组织中次氯酸的“靶向性”示踪，在次氯酸的检测中显示出其他技术手段不可替代的优势。因此，开发新的选择性高、稳定性好的近红外次氯酸荧光检测方法十分必要。

发明内容

本发明所要解决的是开发简便、可靠、准确的机体内次氯酸水平检测方法的技术问题。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

为此，第一方面，本发明提供一种特异性检测次氯酸的近红外荧光探针，其结构式如式I所示：

所述的特异性检测次氯酸的近红外荧光探针I的合成方法，包括如下步骤：

由IR780和4-(2-氨乙基)吗啉在乙腈内一锅反应生成所述探针，见以下反应路线：

第二方面，本发明提供了式I所示近红外荧光探针在检测分析生物体内次氯酸水平的应用。

进一步，所述检测分析为次氯酸的近红外荧光检测分析。

具体地，式I所示荧光探针能通过检测755nm波长处的荧光响应强度以测定次氯酸。

第三方面，本发明提供了式I所示荧光探针在成像分析中的应用。进一步，所述成像分析为次氯酸的近红外荧光成像分析。

具体地，式I所示荧光探针能够对RAW 264.7细胞中的内源性次氯酸进行近红外荧光成像；和，式1所示荧光探针能够对LPS/D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤模型中的次氯酸进行近红外荧光成像；和，式1所示荧光探针能够对LPS诱导的小鼠腿部炎症模型中的次氯酸进行近红外荧光成像。

采用上述技术方案的有益效果是：

1.本发明荧光发射位于近红外区域，组织穿透能力强，对生物样品光损伤小；

2.本发明能对次氯酸给出特异性近红外荧光响应，检测选择性好，不受其他ROS的干扰；

3.本发明细胞毒性低，生物相容性好；

4.本发明结构简单，组成确定，可通过一锅法合成，制备方法简便，且性质稳定，易于储存。

附图说明

图1为本发明式I所示荧光探针(10μM)与不同浓度次氯酸反应后的荧光发射光谱变化。

图2为本发明式I所示荧光探针(10μM)755nm处的荧光强度与次氯酸浓度的关系。