[发明专利]一种HPLC检测氢化可的松中间体中杂质的方法

说明书

本发明提供的一种HPLC检测氢化可的松中间体中杂质的方法，该方法有利于实现生产过程和贮存中对终产品及其关键中间物质质量的控制，具备操作简单，准确性高、精密度高、稳定性和重现性良好，灵敏度高的优点。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，特别涉及一种氢化可的松中间体中杂质的HPLCS检测方法。

醋酸阿奈可他(简称酯化物)中杂质17β-氯甲基二甲基硅基氧基-17α-氰基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(简称硅熔物)的高效液相色谱分析检测方法，。

背景技术

糖皮质激素(GC)是机体内极为重要的一类调节分子，它对机体的发育、生长、代谢以及免疫功能等起着重要的调节作用，是机体应激反应最重要的调节激素，也是临床上使用最为广泛而有效地抗炎和免疫抑制剂，在紧急或危重情况下，糖皮质激素往往为首选。糖皮质激素种类较多根据其半衰期的长短分为长效、中效、短效激素。长效激素包括地塞米松、倍他米松；中效激素包括强的松、强的松龙、甲基强的松龙；短效激素包括可的松，氢化可的松，此外还有吸入激素，如强力布地奈德，二丙酸倍氯米松等。其中，氢化可的松原系肾上腺皮质中的糖皮质激素，是一种可人工合成的天然糖皮质激素，其抗炎活性是皮质酮的3倍，可的松的1.25倍，能抑制感染性与非感染性炎症，也具有免疫抑制作用、抗毒作用，抗休克作用及一定的盐皮质激素活性等，能提高中枢神经系统的兴奋性，对糖、蛋白质、脂肪及电解质代谢也有广泛的影响，并有留水、留钠及排钾作用，血浆半衰期为8至12小时。用于结缔组织病、系统性红斑狼疮、严重支气管哮喘、皮肌炎等过敏疾病，急性白血病、恶性淋巴瘤等病症。

氢化可的松(Hydrocortisone)，其中文化学名为11β,17α,21-三羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮，分子式为C₂₁H₃₀O₅，分子量为362.46。

其结构式为：

氢化可的松对临床应用范围广且疗效显著，近年来一直有其联合用药临床研究的报道，包括氢化可的松联合乌司他丁，联合维生素C维生素B1用于脓毒性休克的效果；联合布地奈德，联合维生素A对于喘息性支气管肺炎的研究；联合山莨菪碱，联合氟氢可的松治疗小儿感染性休克的临床效果；与甲强龙，和泼尼松，氯雷他定等联合治疗小儿过敏性紫癜；联合布洛芬治疗动脉导管未闭早产儿的效果研究；联合他克莫司软膏治疗儿童慢性湿疹等。因此，氢化可的松具有广泛的临床应用。

由于氢化可的松的合成过程，涉及对中间体醋酸阿奈可他(简称酯化物)的纯度控制，酯化物中杂质17β-氯甲基二甲基硅基氧基-17α-氰基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(简称硅熔物)属于基因毒杂质；基因毒杂质又称遗传毒性杂质，其对遗传物质的损伤包括DNA链的断裂、修饰或加合，基因突变，染色体数量和结构畸变等。因此硅熔物的存在关乎氢化可的松基因毒有关物质的工艺与安全性问题。

为了对氢化可的松中间体酯化物基因毒杂质硅熔物进行遗传毒理危险识别，识别目标化合物是否会导致遗传物质的损伤，进一步控制暴露，以减少风险，所以硅熔物的分析检测对于工艺路线的整体基因毒有关物质控制至关重要，如何简单、快速、准确对中间体酯化物及其基因毒杂质硅熔物进行有效分离，建立一套完整高效的分析方法，是质量技术人员面临解决的问题。

发明内容

本发明提供了一种HPLC检测氢化可的松中间体中杂质的方法：

色谱条件：

a.色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，4.6*250mm，5um；

b.流动相：乙腈与水的体积比是27～23：73～77；

c.流速：0.95～1.05mL/min；柱温：30～40℃；进样量：20uL；

d.UV检测器；检测波长为240nm；