[发明专利]基于质谱技术的阳性血培养液病原微生物的快速分离试剂、分离方法及微生物鉴定方法

权利要求书

1.一种阳性血培养液病原微生物的分离试剂，包括用于溶解血细胞的裂解液A、用作清洗剂的清洗液I，其特征在于，所述裂解液A为皂素溶液，所述清洗液I为尿素溶液。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于：所述裂解液A的浓度为0.5g/mL-2g/mL。

3.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述清洗液I的浓度为4mol/L-7mol/L。

4.如权利要求1所述的试剂，其特征在于：所述试剂还包括清洗液II，所述清洗液II为超纯水、去离子水或蒸馏水。

5.一种采用如权利要求1-4中任一项所述的试剂从阳性血培养液中分离细菌的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)将阳性血培养液加入裂解液A，混合均匀，室温静置；

(2)振荡混匀，400-600g离心，弃上清；

(3)向沉淀中加入清洗液I，洗涤后，11000-13000g离心，弃上清；

(4)向沉淀中加入清洗液II，洗涤后，11000-13000g离心，弃上清，沉淀为细菌菌体。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述待测样本与裂解液A的体积比在5：1到5：2之间。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述待测样本与清洗液I、清洗液II的体积比在3：1到2：1之间。

8.一种血液中细菌鉴定的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)按照权利要求5所述细菌分离方法，分离阳性血培养液中的细菌；

(2)取上述细菌分离样品，加入促进细胞中蛋白释放的甲酸以及乙腈；

(3)振荡混匀，11000-13000g离心；

(4)取1μL上清液点样到靶板的孔位上，室温干燥；

(5)覆盖1-2μL的基质于样品上，室温干燥；

(6)采用飞行时间质谱仪进行检测，获得质谱图。

9.如权利要求8所述的方法，其特征为所述甲酸的浓度为60％-80％，所述乙腈的浓度为80％-100％。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述待测样本与甲酸、乙腈的总体积的体积比在50：1到50：3之间。