[发明专利]一种杭白菊培育工艺

权利要求书

1.一种杭白菊培育工艺，其特征在于，包括如下步骤：

S1：培苗，切取长势良好、无病虫害的杭白菊幼嫩的腋芽为外植体，接种至诱导培养基，在25±1℃、光强3000勒克司光条件下诱导形成愈伤组织；

S2：选苗，诱导分化成苗后，对抗性植株进行组织化学染色和分子检测，选留含目的基因插入序列的转基因植株，进行种植；

S3：育苗；

S4：壮苗，将长出2～5条根系的丛生苗接入1/2MS固体培养基中，在25±1℃、光强3000勒克司光条件下进行壮苗培养，获得叶片舒展、叶色浓绿，根系粗壮，苗高3～5cm的小苗；

S5：选用花箱；

S6：种植，取入选的转基因植株种植；

S7：植后管理；

S8：采收，采收应在花芯散开30～50%时进行，采收时应截取花下3～5cm的茎干处，用透气性良好的器具装载，采摘时应选择无病虫害、花势良好的花朵，采后须及时出售或自行加工。

2.根据权利要求1所述的一种杭白菊培育工艺，其特征在于，所述S1中选苗，具体包括如下步骤：

S11：将腋芽用自来水冲洗0.5h，然后在体积浓度为1%洗洁精的水溶液中振摇3mins，用无菌水冲净；

S12：再用体积浓度70%乙醇水溶液浸泡40s，然后用混合消毒液浸泡10mins后，用无菌水冲洗3遍；

S13：在灭菌的滤纸上吸干水分，用解剖刀剥取0.5mm的腋芽尖，然后将腋芽尖接种到装丛生芽诱导培养基的培养瓶中，盖上瓶盖并用封口膜封住瓶口；

S14：置于培养器皿中，在25±1℃、光强3000勒克司光条件下培养15～25天。

3.根据权利要求2所述的一种杭白菊培育工艺，其特征在于，所述S2中目的基因插入序列指目的基因查耳酮合酶基因CHS、标记基因葡糖苷酸酶基因GUS和筛选基因抗潮霉素基因HPT的插入序列，目的基因查耳酮合酶基因CHS片段长960bp。

4.根据权利要求3所述的一种杭白菊培育工艺，其特征在于，所述S3中育苗，包括如下步骤：

S21：观察S1步骤，当切口部位出现绿色突起，20～40天后出现丛生芽，再培养15天，当丛生芽长到4cm时，将丛生芽切下转接到芽增殖培养基中；

S22：在25±1℃、光强3000勒克司光条件下进行增殖培养，获得大量增殖的丛生苗；

S23：再培养6～10天，丛生苗长出2～5条根系，完成芽增殖和生根步骤，最终的生根率为95%，形成完整植株。

5.根据权利要求1所述的一种杭白菊培育工艺，其特征在于，所述S5中选用花箱包括如下步骤：

S31：选用宽50厘米，高达50厘米，长不少于50厘米的箱体，在箱体底部有排水孔；

S32：在箱体中铺一层厚30厘米的泥土层，然后在泥土层上放上有机肥层，有机肥为草木灰和动物粪便的混合物；

S33：再铺一层泥土，泥土保持翻松，该泥土层的厚度为15厘米。

6.根据权利要求5所述的一种杭白菊培育工艺，其特征在于，所述S6中种植包括如下步骤：

S41：在花箱栽种时，挖深6厘米的穴坑，每个穴坑栽入1株苗，穴坑间距15厘米；

S42：浇透水，盖上薄膜，保持湿度80%以上，置通风阴凉处；

S43：栽植2周后逐渐增加光照，在25±1℃、光强3000勒克司光条件下培养12d，3-4周后植株开始生长，发新根，杭白菊叶色浓绿，茎正常挺立，实现杭白菊的繁殖。

7.根据权利要求6所述的一种杭白菊培育工艺，其特征在于，所述S7中植后管理包括打顶修剪、肥水管理、病虫害防治，植苗长到12cm时进行打顶，同时对下部枝芽修剪，保证均衡生长，使花期整齐，产生上视长势；定期每隔一个月施一次肥，每次摘心后施有机肥再到杭白菊现蕾期，施用尿素4次；在花箱上部挂设一张防护网，保持植株不受伤害。