[发明专利]一种乳腺癌无支架类器官专用培养基及培养方法有效
申请号: | 202010441931.0 | 申请日: | 2020-05-22 |
公开(公告)号: | CN111575237B | 公开(公告)日: | 2021-11-16 |
发明(设计)人: | 罗国安;王义明;范雪梅;罗喆明 | 申请(专利权)人: | 江苏信安佳医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
代理公司: | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 | 代理人: | 刘洪勋 |
地址: | 210009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乳腺癌 支架 器官 专用 培养基 培养 方法 | ||
1.一种乳腺癌无支架类器官专用培养基,适用于培养无支架材料的3D乳腺癌类器官,其特征在于,组成组分,以及各组分在培养基中的终浓度或体积百分比如下:
2.一种培养3D乳腺癌类器官的方法,其特征在于,使用权利要求1所述乳腺癌无支架类器官专用培养基,包括以下步骤:
(1)纯化:将分离的原代肿瘤细胞悬液经离心去除上清后,收集的沉淀细胞加入到所述专用培养基中,利用差速贴壁法进行细胞纯化;
(2)扩大培养:纯化后的细胞使用专用培养基继续扩增培养;
(3)无支架肿瘤类器官的建立:将细胞培养至80%融合时,用TrypLE消化,离心后用专用培养基重悬细胞,计数后接种至独特结构的96孔PDO专用培养板中,培养箱内培养即可。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(2)培养过程中,专用培养基的第一次换液时间为接种后5天。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(2)培养过程中,第一次换液培养后,每2天更换一次专用培养基。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(3)培养过程中,每天更换一次专用培养基。
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