[发明专利]基于SARS-CoV-2核蛋白的NTD多肽、编码基因、重组载体、表达方法及应用有效
| 申请号： | 202010443211.8 | 申请日： | 2020-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN111690043B | 公开（公告）日： | 2022-12-02 |
| 发明（设计）人： | 秦小波;高华;王庆伟;张国珍;高继海 | 申请（专利权）人： | 秦小波 |
| 主分类号： | C07K14/165 | 分类号： | C07K14/165;C12N15/50;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/569;C12R1/19 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人： | 胡琳梅 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 sars cov 核蛋白 ntd 多肽 编码 基因 重组 载体 表达 方法 应用 | ||
1.一种基于SARS-CoV-2 核蛋白的NTD多肽，其特征在于，所述NTD多肽是如SEQ IDNo.1-4中任一所示氨基酸序列的多肽。
2. 一种基于SARS-CoV-2 核蛋白的NTD多肽编码基因，其特征在于，编码如权利要求1所述的NTD多肽。
3. 根据权利要求2所述的NTD多肽编码基因，其特征在于，所述NTD多肽编码基因是如SEQ ID No.5-8中任一所示核苷酸序列的编码基因。
4. 一种基于SARS-CoV-2 核蛋白的NTD多肽的重组载体，其包含如权利要求2所述的NTD多肽编码基因。
5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求4所述的重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌，所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21(DE3)、BLR(DE3)、BL21(DE3)pLysS、M15、TB1、DH5α或Top10。
7.一种NTD多肽编码基因的表达方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）设计相应的引物，利用PCR技术，以人工合成的权利要求2所述的编码基因为模板扩增，将扩增的基因片段通过酶切连接的方法，插入到表达质粒中，构建重组表达载体；
2）将重组表达载体转化至大肠杆菌，获得重组基因工程菌；
3）将重组基因工程菌接种于培养基中，通过添加乳糖或异丙基硫代半乳糖IPTG诱导NTD多肽的表达。
8.根据权利要求7所述的表达方法，其特征在于，所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21(DE3)、BLR(DE3)、BL21(DE3)pLysS、M15、TB1、DH5α或Top10。
9.如权利要求1所述的NTD多肽、如权利要求2所述的NTD多肽编码基因或如权利要求4所述的重组载体在制备用于检测SARS-CoV-2的产品中的应用。
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