[发明专利]一种检测原花青素含量的硫酸-香草醛法

说明书

本发明提供一种检测原花青素含量的硫酸‑香草醛法，所述硫酸‑香草醛法包括：提供由样品溶液10μL～40μL、香草醛溶液80μL和硫酸‑甲醇溶液80μL组成的检测体系；待所述检测体系避光反应后，采用酶标仪测定其500nm处的吸光度。本发明提出的改良后的硫酸‑香草醛法，减少了检测体系的体积，由现有的5.5mL减少至170～200μL，选用酶标仪进行检测，减少检测体系转移步骤，增加了方法稳定性及重现性，整个方法具有操作简便、检测快速、准确性高、稳定性好、成本非常低的优点，适于广泛应用于原花青素检测。

技术领域

本发明涉及定量分析检测领域，更具体地，涉及一种检测原花青素含量的硫酸-香草醛法。

背景技术

原花青素(Proanthocyanidins，PC)，又名缩合鞣质，是存在于自然界中的一大类多酚化合物的总称，其低聚形式——低聚原花青素(OPC)，具有很强的抗氧化性，是国际上被公认为清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。原花青素还具有很强的生物活性，如花生种皮中的原花青素可以降血糖，苹果中的原花青素具有抗癌活性，红酒中的原花青素可预防心血管疾病，蚕豆壳原花青素可降低胆固醇含量，增强血管弹性，降低血液粘稠度，葡萄籽原花青素可抗炎、减低血压等。这些研究结果揭示原花青素在医药、保健品领域具有广阔的应用前景。

目前，原花青素含量的检测方法有紫外分光光度法、硫酸-香草醛法、正丁醇-盐酸法、红外光谱法、高效液相色谱-质谱联用法。紫外分光光度法应用原花青素只在紫外区有唯一特征吸收峰(280nm)，进行原花青素含量测定，该方法仅适用于原花青素纯度或含量特别高情况。正丁醇-盐酸法在盐酸和加热的条件下使原花青素生成稳定的红色花青素，测定546nm处吸光度。红外光谱及液相-质谱法灵敏度相对高，但是仪器设备昂贵，应用广泛性较差。硫酸-香草醛具有操作简单、重现性好、广谱适用的特点，是目前应用较广泛的原花青素含量测定方法。

但是，现有的硫酸-香草醛法仍存在稳定性和重复性不够优良，对于微量样品难以准确检测的不足。

发明内容

本发明实施例提供一种检测原花青素含量的硫酸-香草醛法，通过构建微量反应体系以及采用酶标仪作为检测仪器，达到提高方法稳定性和重现性，快速准确检测的效果。

本发明实施例提供一种检测原花青素含量的硫酸-香草醛法，包括：提供由样品溶液10μL～40μL、香草醛溶液80μL和硫酸-甲醇溶液80μL组成的检测体系；待所述检测体系避光反应后，采用酶标仪测定其500nm处的吸光度。

相较于现有技术，本发明提出的改良后的硫酸-香草醛法，减少了检测体系的体积，由现有的5.5mL减少至170～200μL，选用酶标仪进行检测，减少检测体系转移步骤，增加了方法稳定性及重现性，整个方法具有操作简便、检测快速、准确性高、稳定性好、成本非常低的优点，适于广泛应用于原花青素检测。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。

本发明实施例提供一种检测原花青素含量的硫酸-香草醛法，主要包括以下步骤：

步骤S1、提供由样品溶液10μL～40μL、香草醛溶液80μL和硫酸-甲醇溶液80μL组成的检测体系。

所述样品溶液为利用溶剂提取待测样品中原花青素得到的均一透明的溶液。所述待测样品可以为花生种皮、葡萄籽等天然植物，也可以为红酒等食品，还可以为葡萄籽提取物或含葡萄籽提取物的药品或保健品。配制样品溶液所用的溶剂优选为甲醇。