[发明专利]一种中成药抗炎活性的评价方法及其应用

权利要求书

1.一种中成药抗炎活性的评价方法，其特征在于，所述评价方法包括将中成药加入到细胞培养体系中，而后检测中成药的细胞毒性和与炎症相关生理指标，通过对检测结果进行区别加权评分，做出对中成药抗炎活性的评价。

2.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述中成药为固体时，在中成药细胞毒性检测之前，还需要对中成药有效成分进行提取，得到中成药提取物。

3.根据权利要求2所述的评价方法，其特征在于，所述中成药有效成分的提取方法包括：将中成药粉碎后的粉体经萃取得到萃取液，萃取液经干燥后得到粉末；

优选地，所述的萃取包括超声萃取；

优选地，所用萃取液为有机溶剂水溶液；优选为低碳醇水溶液；更优选为乙醇水溶液；

进一步优选地，乙醇水溶液所用乙醇和所得乙醇水溶液的体积比为5～9:10，优选为7：10；

进一步优选地，中成药粉碎后的粉体与乙醇水溶液的质量体积比为1:5～15，优选1：10；

进一步优选地，乙醇超声提取时间为10～40min，优选30min；

优选地，离心加速度为2000g～8000g，优选4000g；

进一步优选地，离心处理时间为5～20min，优选10min；

优选地，干燥方法采用升温减压浓缩干燥；

进一步优选地，干燥温度为35～60℃，优选40℃。

4.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述的中成药的细胞毒性检测方法包括细胞活力检测。

5.根据权利要求4所述的评价方法，其特征在于，所述的细胞活力检测选用的细胞包括巨噬细胞；

优选地，选用的细胞为小鼠腹腔单核巨噬细胞。

6.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述的与炎症相关生理指标包括NO生成量和细胞因子表达水平；

优选地，所述的细胞因子包括TNF-α和/或IL-6。

7.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述的中成药抗炎活性的综合评价方法包括百分制评价方法。

8.根据权利要求7所述的评价方法，其特征在于，所述的百分制评价方法采用如下计算公式：

其中Aia为抗炎活性评分，取值范围0～100；CV为中成药细胞毒性评分，取值范围为0～100；CF_i为第i项与炎症相关生理指标水平评分，取值范围为0～100；

优选地，CV评分方法包括以未加细胞的培养基作为空白组，以加入细胞的培养基作为对照组，向对照组中加入中成药或中成药提取物后作为处理组，对各组细胞活性进行检测，将检测结果按照计算公式CV＝(处理组细胞活性-空白组细胞活性)/(对照组细胞活性-空白组细胞活性)×100进行计算；

进一步优选地，CV计算公式中细胞活性是通过对细胞的吸光度检测定量表征的。

9.根据权利要求8所述的评价方法，其特征在于，所述的与炎症相关生理指标水平的检测方法包括：选用未表现炎症的细胞作为对照组，构建诱导炎症模型作为模型组，向模型组中添加中成药或中成药提取物作为处理组，其中CF_i的计算方法为(模型组中与炎症相关生理指标水平-处理组与炎症相关生理指标水平)/(模型组与炎症相关生理指标水平-对照组与炎症相关生理指标水平)×100；

优选地，构建诱导炎症模型是通过向未表现炎症的细胞中加入炎症诱导因子使其表现出炎症来构建的；

进一步优选地，所述的炎症诱导因子包括脂多糖。

10.如权利要求1～9任一项所述的评价方法在比较不同中成药抗炎活性中的应用；

优选地，所述评价方法用于判断非抗炎中成药能否转用于抗炎；

优选地，应用所述评价方法判断清金止嗽化痰丸和芎菊上清丸能否用于抗炎。