[发明专利]用于制备羊支原体肺炎疫苗的组合菌株、羊支原体肺炎三价灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明提供了用于制备羊支原体肺炎疫苗的组合菌株、羊支原体肺炎三价灭活疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品技术领域，所述组合菌株包括绵羊肺炎支原体菌株MO_NM01、MO_NM02和MO_NM03；所述绵羊肺炎支原体菌株MO_NM01的保藏编号为CGMCC No.19698；所述绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02的保藏编号为CGMCC No.19699；所述绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02的保藏编号为CGMCC No.19700。所述组合菌株中的看家基因、结构蛋白和菌株的多抗均存在差异，利用所述组合菌株制备的三价灭活苗可以对不同的毒株起到良好的保护作用，免疫保护率高。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，尤其涉及用于制备羊支原体肺炎疫苗的组合菌株、羊支原体肺炎三价灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

绵羊肺炎支原体是从绵羊或山羊支气管、肺脏中分离得到的一种最常见的病原菌，主要引起羊支原体肺炎。羊支原体肺炎是一种高度接触性的呼吸道传染病。绵羊支原体肺炎又称绵羊传染性胸膜肺炎，四季均有流行，尤其夏秋换季时节最易爆发，各年龄段的羊只均可受感染，但特别以1-3月龄的羔羊发病和死亡率最高，个别羊场的羔羊死亡率可达50％以上。患病羊临床特征为高热、咳嗽、喘气、肺和胸膜发生浆液性及纤维素性炎症，呈急性或慢性经过。由于在其导致的慢性感染中，病程可达数月至数年，因此即使是幸免耐过的羊只也会因肺部受损而导致生长速度缓慢、出栏率低，同时料肉比明显升高、毛质毛量下降，造成人力和饲料的双重浪费，严重危害着羊养殖业的发展。

使用疫苗进行免疫接种是预防羊支原体肺炎病发生与流行的核心技术，但是用单一的菌株目前免疫保护效果不理想，这是制约该病疫苗免疫效果的主要因素。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供用于制备绵羊支原体肺炎疫苗的组合菌株、绵羊支原体肺炎三价灭活疫苗及其制备方法；所述组合菌株包括三种分离自不同时间不同地点的菌株，所述组合菌株中的看家基因、结构蛋白和菌株的多抗均存在差异，利用所述组合菌株制备的三价灭活苗可以对不同的毒株起到良好的保护作用，疫苗菌株的多样性提高了疫苗的免疫保护率。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了用于制备羊支原体肺炎疫苗的组合菌株，包括绵羊肺炎支原体菌株MO_NM01、绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02和绵羊肺炎支原体菌株MO_NM03；所述绵羊肺炎支原体菌株MO_NM01的保藏编号为CGMCC No.19698；所述绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02的保藏编号为CGMCC No.19699；所述绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02的保藏编号为CGMCC No.19700。

本发明提供了一种用于制备羊支原体肺炎疫苗的菌液制剂，包括独立存在的绵羊肺炎支原体菌株MO_NM01菌液、绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02菌液和绵羊肺炎支原体菌株MO_NM03菌液；

所述绵羊肺炎支原体菌株MO_NM01菌液、绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02菌液和绵羊肺炎支原体菌株MO_NM03菌液的菌浓度分别≥5×10E8CCU/ml。

本发明提供了一种羊支原体肺炎三价灭活疫苗，包括灭活所述的菌液制剂和佐剂。

优选的，所述灭活的菌液制剂和佐剂的质量比为(0.8～1.2):(0.8～1.2)。

优选的，所述佐剂为水包油包水矿物油。

优选的，所述灭活的菌液制剂中绵羊肺炎支原体菌株MO_NM01菌液、绵羊肺炎支原体菌株MO_NM02菌液和绵羊肺炎支原体菌株MO_NM03菌液的体积比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)。

本发明还提供了所述的羊支原体肺炎三价灭活疫苗的制备方法，包括以下步骤：