[发明专利]一种促进STAT3活化的人源蛋白及其药物应用

说明书

本发明公开一种促进STAT3活化的人源蛋白MSX1，其特征在于，其DNA序列如SEQ ID NO：1所示；其氨基酸序列部分SEQ ID NO：2所示。本发明还公开一种促进STAT3活化的人源蛋白MSX1的获得方法，其特征在于，包括以下步骤：利用高度特异的STAT3荧光素酶报告基因载体，在人胚肾293细胞中转染人的10000多个独立的表达克隆，通过荧光素酶报告基因实验进行系统筛选获得了促进STAT3活化的调节因子。本发明还公开MSX1在制备预防或治疗与STAT3活化失调相关肿瘤的药物方面的应用。本发明针对MSX1设计抑制药物，通过抑制MSX1来降低STAT3的活性，用于各种肿瘤的治疗。

技术领域

本发明属于生物基因技术领域，涉及促进转录因子STAT3（signal transducerand activator of transcription 3）活化的核因子，具体涉及一种促进STAT3活化的人源蛋白及其在制备防治与STAT3活化失调相关肿瘤的药物方面的应用。

背景技术

STAT3（signal transducer and activator of transcription 3）是一种存在与人体，可在各种类型细胞中广泛表达的转录因子，主要以没有活性的单体形式存在于细胞质中。被IL-6、OSM、LIF等细胞因子激活后，STAT3转录活性结构域的酪氨酸残基发生磷酸化，并与另一个磷酸化的STAT3相互作用，以二聚体的形式进入细胞核，结合到特异的增强子元件上，调控大量与细胞增殖、分化、凋亡及血管新生等相关基因的转录。

虽然在正常细胞中STAT3是一个瞬时激活、受到严密调控的转录因子，但在肿瘤细胞中，STAT3却是一个高表达并持续性激活的癌基因，已被证实与头颈癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、白血病等多种实体肿瘤的发生、转移和归巢密切相关(Hodge et al., 2005;Yu and Jove, 2004)。

因此，STAT3活化途径中的关键因子均可作为药物涉及筛选的靶标，调节STAT3活性的研究为肿瘤的治疗提供了新的途径。如STAT3的直接抑制剂WP1066，目前正处于治疗复发性脑瘤患者的I期临床试验阶段；另一个抑制磷酸化STAT3（p-STAT3）的小分子化合物WP1220也已经在2019年8月被允许进行皮肤T细胞淋巴瘤局部治疗的临床试验（Moleculin.Retrieved November 12, 2019, from http://www.moleculin.com/）。

发明内容

本发明目的是提供一种促进STAT3活化的人源蛋白及其在制备防治与STAT3活化失调相关肿瘤的药物方面的应用，为治疗肿瘤提供新的药物靶标和治疗新途径。

本发明的实施例提供一种促进STAT3活化的人源蛋白MSX1，其特征在于，其DNA序列如SEQ ID NO：1所示。

进一步的，一种促进STAT3活化的人源蛋白MSX1，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID NO：2所示。

本发明的实施例还提供一种促进STAT3活化的人源蛋白MSX1的获得方法，其特征在于，包括以下步骤：利用高度特异的STAT3荧光素酶报告基因载体，在人胚肾293细胞中转染人的10000多个独立的表达克隆，通过荧光素酶报告基因实验进行系统筛选获得了促进STAT3活化的调节因子。

本发明的实施例还提供MSX1在制备预防或治疗与STAT3活化失调相关肿瘤的药物方面的应用。

进一步的，所述药物通过抑制MSX1表达来降低STAT3的活性。

本发明的上述技术方案的有益效果如下：

（1）本发明的实施例通过在293细胞中过量表达MSX1能够剂量依赖性地活化STAT3，利用CRISPR Cas9 技术获得MSX1缺失的293细胞，并证明MSX1的缺失能够抑制STAT3的活化，并使IL-6、OSM和LIF诱导STAT3激活的能力明显降低。