[发明专利]牛膝多糖在制备预防非小细胞肺癌转移药物中的应用

说明书

本发明公开了牛膝多糖在制备非小细胞肺癌转移预防药物方面的应用。本发明所述的牛膝多糖具有高效低毒性，在细胞水平证明牛膝多糖可明显抑制非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及对血管内皮细胞的黏附；在动物水平证明牛膝多糖对循环肿瘤细胞远端肺转移具有明显的抑制作用，且无细胞、组织毒性和不良反应，因而具有制备预防肿瘤转移药物应用的前景。

技术领域

本发明属于药物领域，具体涉及牛膝多糖在制备预防非小细胞肺癌转移药物中的应用。

背景技术

肺癌是导致癌症死亡的主要因素，据2019全球癌症统计，肺癌在美国新发癌症病例中达到12％，死亡率高达23％，其中非小细胞肺癌占比约为85％。在非小细胞肺癌患者中近2/3存在原癌基因突变，大约1/2的患者可以获得靶向治疗。但绝大多数非小细胞患者后期将产生药物抵抗，引起更为严重的复发、转移，这也是导致90％的患者死亡的主要因素。目前对于已经转移的非小细胞肺癌患者的治疗主要以靶向抗体结合化疗为主，其对转移的抑制效果却是短暂的，仅能延长患者几个月的生存期，但却不能有效的抑制癌症进展，加之长期给药后导致耐药性，使得患者承受巨大的痛苦，给家庭带来严重的经济负担。因此，对于非小细胞肺癌患者急需研发各种有效干预肿瘤转移的药物。

在癌症早期，患者体内已存在播散肿瘤细胞(DTCs)和循环肿瘤细胞(CTCs)，这些细胞与患者是否发生肿瘤转移密切相关。肿瘤转移取决于肿瘤细胞的状态和转移前的微环境。最近研究显示，与原位肿瘤细胞相比，那些发生转移的肿瘤细胞在基因水平已经发生了突变，表现出更强的侵袭特性和器官易感性。尽管在癌症早期患者体内已存在DTCs和CTCs,但仅有0.02％的肿瘤细胞可以存活并形成转移，转移前的微环境对于肿瘤细胞的存活至关重要。微环境中的血小板为肿瘤细胞形成一种保护屏障，使其逃逸免疫细胞的杀伤；微环境中大量免疫细胞和炎症因子促使血管内皮损伤，分泌细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)增强肿瘤细胞和靶器官血管内皮的黏附，促进肿瘤细胞的存活。因此，对于肿瘤转移的预防，一方面通过抑制肿瘤细胞的侵袭性，另一方面抑制微环境中靶器官血管内皮的损伤。

牛膝(Achyranthes bidentata Blume)为苋科植物牛膝的干燥根，是我国传统的中药。牛膝具有重要的药用价值，具有活血祛瘀、抗炎、抗氧化、促进伤口愈合及抗肿瘤等重要作用。牛膝多糖(Achyranthes bidentata polysaccharide)，从牛膝根部提取的主要活性成分，在抗衰老、增强免疫力、促进骨愈合及抗肿瘤方面表现出重要的调节作用。

现有技术中，牛漆多糖在抗肿瘤方面的研究主要有：1、牛漆多糖能显著提高S180荷瘤小鼠淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)活性和肿瘤坏死因子β生成；2、通过激活机体的免疫系统间接达到抗瘤目的；3、可能通过引起细胞膜唾液酸含量升高、膜磷脂含量降低，引起直接细胞毒作用；4、活化巨噬细胞的激活；5、增强骨髓造血功能，加快白细胞发育，提高免疫水平；6、提高肿瘤患者红细胞粘附肿瘤细胞的能力，促进红细胞的抗癌免疫功能；等等。现有技术还未有针对牛漆多糖抑制非小细胞肺癌转移的研究，特别是牛膝多糖对非小细胞肺癌细胞黏附于血管内皮细胞的抑制作用的研究。

发明内容

本发明的目的在于提供牛膝多糖在制备预防肿瘤转移药物中的应用。

本发明的具体内容如下：

本发明首先提供了牛膝多糖在制备预防非小细胞肺癌转移药物中的应用，所述牛膝多糖提取于苋科植物土牛膝Achyranthes aspera的干燥根，提取方法为：按质量份称取50份牛膝粉，加入500份纯净水，混合均匀后过滤提取3h，加入乙醇进行沉淀；将沉淀物加水复溶，加入sevage试剂去除蛋白质，将获得的牛膝多糖水溶液冷冻干燥，得粗牛膝多糖，粗牛膝多糖经过CM-Sephadex C50和Sephadex G 50纤维柱层析，获得纯牛膝多糖。

将牛膝多糖用于制备抑制非小细胞肺癌细胞黏附于血管内皮细胞的药物。