[发明专利]多蛋白体系的共生产方法、多蛋白体系的共生产系统及应用

权利要求书

1.一种多蛋白体系的共生产方法，其特征在于，包括如下步骤：

提供表达溶菌蛋白的载体、多种表达蛋白的载体及蛋白表达菌株，每种所述表达蛋白的载体分别表达所述多蛋白体系中的一种蛋白，且不同的所述表达蛋白的载体表达的蛋白各不相同；

将所述表达溶菌蛋白的载体与每种所述表达蛋白的载体分别共转入到所述蛋白表达菌株中，得到多种共表达菌株；

将全部的所述共表达菌株进行共培养，当所述共表达菌株的生长密度达到自主裂解密度时发生自主裂解，释放出各自表达的蛋白，得到所述多蛋白体系；

其中，所述多蛋白体系包括用于蛋白质翻译、能量再生的蛋白质和/或催化合成化合物的酶。

2.根据权利要求1所述多蛋白体系的共生产方法，其特征在于，所述多蛋白体系选自聚酮化合物合成酶体系、非核糖体多肽合成酶体系、重组元件蛋白质合成体系中的至少一种。

3.根据权利要求2所述多蛋白体系的共生产方法，其特征在于，所述重组元件蛋白质体系包括翻译起始因子1、翻译起始因子2、翻译起始因子3、翻译延伸因子G、翻译延伸因子Tu、翻译延伸因子Ts、翻译延伸因子4、翻译释放因子1、翻译释放因子2、翻译释放因子3、核糖体循环因子、甲硫氨酰-tRNA甲酰转移酶、肌酸激酶、肌激酶、二磷酸核苷激酶、焦磷酸酶和22种氨酰-tRNA合成酶。

4.根据权利要求3所述多蛋白体系的共生产方法，其特征在于，所述重组元件蛋白质合成体系还包括T7 RNA聚合酶、二硫键异构酶、分子伴侣蛋白中的至少一种。

5.根据权利要求1所述多蛋白体系的共生产方法，其特征在于，所述表达溶菌蛋白的载体为表达噬菌体φX174 E蛋白的质粒ePop。

6.一种多蛋白体系的共生产系统，其特征在于，包括：

共表达菌株制备单元，用于制备多种共表达菌株，每种所述共表达菌株表达所述多蛋白体系中的一种蛋白以及溶菌蛋白，且不同的所述共表达菌株表达的蛋白各不相同，具体为：提供表达溶菌蛋白的载体、多种表达蛋白的载体及蛋白表达菌株，每种所述表达蛋白的载体分别表达所述多蛋白体系中的一种蛋白，且不同的所述表达蛋白的载体表达的蛋白各不相同；将所述表达溶菌蛋白的载体与每种所述表达蛋白的载体分别共转入到所述蛋白表达菌株中，得到多种共表达菌株；其中，当所述共表达菌株的生长密度达到自主裂解密度时，所述溶菌蛋白使菌株发生自主裂解；

细胞培养单元，用于培养所述共表达菌株单元中的共表达菌株，具体为：将全部的所述共表达菌株进行共培养，当所述共表达菌株的生长密度达到自主裂解密度时发生自主裂解，释放出各自表达的蛋白，培养基上清中得到所述多蛋白体系；

其中，所述多蛋白体系包括用于蛋白质翻译、能量再生的蛋白质和/或催化合成化合物的酶。

7.根据权利要求6所述多蛋白体系的共生产系统，其特征在于，所述多蛋白体系选自聚酮化合物合成酶体系、非核糖体多肽合成酶体系、重组元件蛋白质体系中的至少一种。

8.根据权利要求7所述多蛋白体系的共生产系统，其特征在于，所述重组元件蛋白质体系包括翻译起始因子1、翻译起始因子2、翻译起始因子3、翻译延伸因子G、翻译延伸因子Tu、翻译延伸因子Ts、翻译延伸因子4、翻译释放因子1、翻译释放因子2、翻译释放因子3、核糖体循环因子、甲硫氨酰-tRNA甲酰转移酶、肌酸激酶、肌激酶、二磷酸核苷激酶、焦磷酸酶和22种氨酰-tRNA合成酶。

9.根据权利要求8所述多蛋白体系的共生产系统，其特征在于，所述重组元件蛋白质体系还包括T7 RNA聚合酶、二硫键异构酶、分子伴侣蛋白中的至少一种。

10.权利要求6-9任意一项所述多蛋白体系的共生产系统在体外合成蛋白质和/或化合物中的应用。