[发明专利]一种纤维素乙醇的制备方法

权利要求书

1.一种纤维素乙醇的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：

(1)选择预先筛选出的降解纤维素的菌株：耐寒短杆菌；酿酒酵母菌株：BY4741酿酒酵母菌；将上述耐寒短杆菌接种于无菌的LB培养基中220r/min摇菌8h后备用，酿酒酵母菌接种于YPD培养基中220r/min摇菌8h后备用，作为后续发酵种子液；

(2)准备发酵产酶材料：农业秸秆粉、氯化钠、胰蛋白胨、酵母粉和蒸馏水；

(3)准备所需的仪器和设备：全温摇瓶柜、顶空气相色谱仪、离心机、pH计、玻璃棒和烧杯；

(4)选用农作物秸秆作为实验对象，按照工艺参数，对该农业废弃物进行发酵培养制备乙醇；

(5)具体制备步骤如下：

(5-1)取上述步骤(1)中得到的LB发酵种子液按照4%的接种量加入无菌的农业秸秆发酵培养基中；

(5-2)将接种后的发酵产酶培养基放入全温摇瓶柜，180r/min恒温摇床培养36h；

(5-3)向摇菌36h后的发酵瓶中按照5%的接种量加入YPD发酵种子液；

(5-4)将再次接种后的发酵瓶放入全温摇瓶柜，100r/min恒温摇床培养60h；

(5-5)接种YPD发酵种子液后每隔12h，取5mL发酵液放4℃保存备用；

(5-6)将所取发酵液10000r/min离心10min所得上清液即为制备的含纤维素乙醇的物料；

(5-7)通过顶空气相色谱法测定含纤维素乙醇的物料中的乙醇含量；分离得到纤维素乙醇。

2.根据权利要求1所述的一种纤维素乙醇的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的农业秸秆粉为玉米秸秆粉、大豆秸秆粉、花生秸秆粉、高粱秸秆粉、小麦秸秆粉、水稻秸秆粉中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的一种纤维素乙醇的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的工艺参数为：玉米秸秆粉的浓度为10%，氯化钠2%，胰蛋白胨的浓度为3%，酵母粉1.5%，培养基PH=6，接种量LB发酵种子液为2%，接种量YPD发酵种子液为5%。

4.根据权利要求1所述的一种纤维素乙醇的制备方法，其特征在于：步骤(5-1)中所述的农业秸秆发酵培养基pH为6。

5.根据权利要求1所述的一种纤维素乙醇的制备方法，其特征在于：步骤(5-2)中所述的培养温度为15℃。

6.根据权利要求1所述的一种纤维素乙醇的制备方法，其特征在于：步骤(5-4)中所述的培养温度为30℃。

7.根据权利要求1所述的一种纤维素乙醇的制备方法，其特征在于：步骤(5-7)中所述的含纤维素乙醇的物料，发酵原料为农作物植物秸秆，生产成本低；通过纤维素降解菌与酿酒酵母同步共发酵，生产工艺简单；生产过程中无其他污染产生，同时利用农业废弃物，减少环境污染；发酵过程中发酵条件简单，反应温度较低，降低能源损耗；发酵原料为农业废弃物，原料来源广泛，适应面广。