[发明专利]一种长梗杜鹃用抗褐化愈伤组织诱导培养基及其应用

说明书

本发明提供了一种长梗杜鹃用抗褐化愈伤组织诱导培养基及其应用，涉及植物组培技术领域。本发明所述培养基中以阿魏酸作为抗褐化剂，当浓度为48.5mg·L^‑1时阿魏酸对愈伤组织的生长量抑制不明显，却能显著的降低愈伤组织的褐化指数；同时利用所述培养基获得大量长梗杜鹃的分化芽或组培苗时，将愈伤组织接种到含有相同浓度阿魏酸的分化培养基中，可使愈伤组织的分化率达到17.9％，从而在一定程度上解决了长梗杜鹃新品种组培苗难以获得而无法上市的瓶颈问题。

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，具体涉及一种长梗杜鹃用抗褐化愈伤组织诱导培养基及其应用。

背景技术

长梗杜鹃系杜鹃属、杜鹃亚属(subg.Rhododendron)、越桔杜鹃组(sect.Vireya)、类越桔杜鹃亚组(subsect.Pseudovireya)常绿植物。其花朵质地厚实、花色鲜黄，比同属的滇越杜鹃(R.rushforthii)、羊踯躅(R.molle)、鲜黄杜鹃(R.xanthostephanum)、纯黄杜鹃(R.chrysodoron)、硫磺杜鹃(R.sulfureum)等花色更为纯正。国际上，杜鹃花的花色育种趋势为纯色花，特别是黄色和蓝色更为珍贵。更令人称奇的是，与野生杜鹃花期多集中于3～6月不同，长梗杜鹃的自然花期为11月下旬至翌年的2月上旬，在市场上有着巨大的产业发展前景。

此外，长梗杜鹃的分布区极其狭窄，目前已知的仅位于云南省麻栗坡县的4个野生居群，各居群植株数为80～350株，海拔介于1183～1316m。根据IUCN Red List Categoriesand Criteria(version3.1)评估标准，长梗杜鹃已经处于极危状态[CRB1ab(i,iii,v)]。受人为干扰严重，加之种群内实生苗较少，自然更新较弱，为典型的极小种群野生植物(PlantSpecies with Extremely Small Populations,简称PSESP)，野生资源状况令人担忧，亟待保护。

长梗杜鹃为中国特有种，花色纯黄明亮、花期独特，具有极高的观赏价值和市场开发潜力。然而，野外由于分布区单一，数量稀少，加之人为破坏严重，已经处于极度濒危状态。因此开展针对长梗杜鹃的组培快繁研究，不仅对今后开发利用，而且对有效保护该植物资源都刻不容缓，具有重要意义，但是现有的长梗杜鹃组培体系，均存在愈伤组织褐化严重，分化能力低下的问题，从而导致难以获得高质量的长梗杜鹃组培苗。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种长梗杜鹃用抗褐化愈伤组织诱导培养基及其应用，利用所述培养基可显著降低长梗杜鹃在诱导愈伤组织时的褐化现象，并提高愈伤组织的分化率。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种长梗杜鹃用抗褐化愈伤组织诱导培养基，所述培养基以改良MS为基础培养基，还包括以下浓度的组分：6-BA2.0mg·L^-1、2,4-D3.0mg·L^-1、蔗糖30g·L^-1、琼脂5.5g·L^-1、活性炭1g·L^-1、精胺4.5mg·L^-1、占所述培养基体积10％的椰子汁和阿魏酸48.5mg·L^-1。

本发明还提供了所述培养基在获得长梗杜鹃分化芽中的应用。

本发明还提供了一种基于所述培养基的获得长梗杜鹃分化芽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以未成熟的花苞为外植体，将所述外植体接种于所述培养基上进行诱导培养，得愈伤组织；