[发明专利]与油茶种子油脂中棕榈油酸含量相关的SNP分子标记及其应用有效

专利信息
申请号: 202010456767.0 申请日: 2020-05-26
公开(公告)号: CN111500763B 公开(公告)日: 2023-03-21
发明(设计)人: 王开良;林萍;姚小华 申请(专利权)人: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 商秀玲
地址: 311400 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 油茶 种子 油脂 棕榈 油酸 含量 相关 snp 分子 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.与油茶种子油脂中棕榈油酸含量相关的SNP分子标记,其特征在于,所述SNP分子标记为PB.10070.2-202或PB.7527.1-77;

其中,SNP分子标记PB.10070.2-202的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中第202位的多态性为G/A;SNP分子标记PB.7527.1-77的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,其中第77位的多态性为G/A。

2.根据权利要求1所述的SNP分子标记,其特征在于,所述SNP分子标记PB.10070.2-202中,具有所述多态性的位点的基因型为AA,对应于高棕榈油酸含量,基因型为GG,对应于低棕榈油酸含量;

所述SNP分子标记PB.7527.1-77中,具有所述多态性的位点的基因型为AA,对应于高棕榈油酸含量,基因型为GG或GA,对应于低棕榈油酸含量。

3.与油茶种子油脂中棕榈油酸含量相关的SNP分子标记组合,其特征在于,所述SNP分子标记组合为PB.10070.2-202和PB.7527.1-77;

其中,标记PB.10070.2-202和PB.7527.1-77同权利要求1或2中所述。

4.用于扩增权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的SNP分子标记组合的引物。

5.根据权利要求4所述的引物,其特征在于,包括如SEQ ID NO.3-4和/或SEQ ID NO.5-6所示的引物。

6.含有权利要求4或5所述的引物的试剂或试剂盒。

7.权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的SNP分子标记组合或权利要求4或5所述的引物或权利要求6所述的试剂或试剂盒的以下任一应用:

(1)在鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型中的应用;

(2)在油茶种质资源鉴定、改良或分子标记辅助育种中的应用,所述种质资源鉴定、改良或分子标记辅助育种的性状为种子油脂中的棕榈油酸含量;

(3)在油茶种子油脂中棕榈油酸含量早期预测中的应用;

(4)在筛选高棕榈油酸含量油茶中的应用。

8.鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型的方法,其特征在于,包括:

(1)提取待鉴定油茶的总RNA,反转录合成cDNA;

(2)以cDNA为模板,利用SEQ ID NO.3-4和/或SEQ ID NO.5-6所示引物进行PCR扩增;

(3)分析PCR扩增产物中权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的SNP分子标记组合的基因型,根据所述基因型判断待鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应程序为:94~95℃,3~5min;94~95℃,15~30s,65~69℃,40~60s,38~45个循环;67~70℃,3~6min。

10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述判断待鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型的方法如下:

若SNP分子标记PB.10070.2-202具有所述多态性的位点的基因型为AA,则待鉴定油茶为高棕榈油酸含量,若基因型为GG,则待鉴定油茶为低棕榈油酸含量;和/或,

若SNP分子标记PB.7527.1-77具有所述多态性的位点的基因型为AA,则待鉴定油茶为高棕榈油酸含量,若基因型为GG或GA,则待鉴定油茶为低棕榈油酸含量。

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