[发明专利]与油茶种子油脂中棕榈油酸含量相关的SNP分子标记及其应用有效
申请号: | 202010456767.0 | 申请日: | 2020-05-26 |
公开(公告)号: | CN111500763B | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 王开良;林萍;姚小华 | 申请(专利权)人: | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 商秀玲 |
地址: | 311400 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 油茶 种子 油脂 棕榈 油酸 含量 相关 snp 分子 标记 及其 应用 | ||
1.与油茶种子油脂中棕榈油酸含量相关的SNP分子标记,其特征在于,所述SNP分子标记为PB.10070.2-202或PB.7527.1-77;
其中,SNP分子标记PB.10070.2-202的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中第202位的多态性为G/A;SNP分子标记PB.7527.1-77的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,其中第77位的多态性为G/A。
2.根据权利要求1所述的SNP分子标记,其特征在于,所述SNP分子标记PB.10070.2-202中,具有所述多态性的位点的基因型为AA,对应于高棕榈油酸含量,基因型为GG,对应于低棕榈油酸含量;
所述SNP分子标记PB.7527.1-77中,具有所述多态性的位点的基因型为AA,对应于高棕榈油酸含量,基因型为GG或GA,对应于低棕榈油酸含量。
3.与油茶种子油脂中棕榈油酸含量相关的SNP分子标记组合,其特征在于,所述SNP分子标记组合为PB.10070.2-202和PB.7527.1-77;
其中,标记PB.10070.2-202和PB.7527.1-77同权利要求1或2中所述。
4.用于扩增权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的SNP分子标记组合的引物。
5.根据权利要求4所述的引物,其特征在于,包括如SEQ ID NO.3-4和/或SEQ ID NO.5-6所示的引物。
6.含有权利要求4或5所述的引物的试剂或试剂盒。
7.权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的SNP分子标记组合或权利要求4或5所述的引物或权利要求6所述的试剂或试剂盒的以下任一应用:
(1)在鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型中的应用;
(2)在油茶种质资源鉴定、改良或分子标记辅助育种中的应用,所述种质资源鉴定、改良或分子标记辅助育种的性状为种子油脂中的棕榈油酸含量;
(3)在油茶种子油脂中棕榈油酸含量早期预测中的应用;
(4)在筛选高棕榈油酸含量油茶中的应用。
8.鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型的方法,其特征在于,包括:
(1)提取待鉴定油茶的总RNA,反转录合成cDNA;
(2)以cDNA为模板,利用SEQ ID NO.3-4和/或SEQ ID NO.5-6所示引物进行PCR扩增;
(3)分析PCR扩增产物中权利要求1或2所述的SNP分子标记或权利要求3所述的SNP分子标记组合的基因型,根据所述基因型判断待鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应程序为:94~95℃,3~5min;94~95℃,15~30s,65~69℃,40~60s,38~45个循环;67~70℃,3~6min。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述判断待鉴定油茶种子油脂中棕榈油酸含量表型的方法如下:
若SNP分子标记PB.10070.2-202具有所述多态性的位点的基因型为AA,则待鉴定油茶为高棕榈油酸含量,若基因型为GG,则待鉴定油茶为低棕榈油酸含量;和/或,
若SNP分子标记PB.7527.1-77具有所述多态性的位点的基因型为AA,则待鉴定油茶为高棕榈油酸含量,若基因型为GG或GA,则待鉴定油茶为低棕榈油酸含量。
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