[发明专利]Carboxy-DiI类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种Carboxy‑DiI类化合物及其制备方法和应用，该Carboxy‑DiI类化合物作为水溶性较高的荧光染料，荧光效率高，可用于心脏活体动脉灌注，均匀标记微小动脉血管内皮细胞，特异性好，灵敏度高。

技术领域

本发明涉及检测领域，尤其涉及一种Carboxy-DiI类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

荧光染料作为标记探针在化学、生物等领域得到广泛的应用，尤其是在生命科学、临床分子诊断、免疫功能分析等方面备受关注。其中，Cy系列荧光染料是应用最广的染料，具有摩尔消光系数大、稳定性好、荧光量子产率高等优点。例如，在红外(NIR)可见光区的吸收及发射范围内，羰化青染料作为有助于生物成像的探针试剂，具有折光率小、组织渗透深、背景自发荧光干扰小等优点，近些年来备受瞩目。然而，对于慢性心脏病患者而言，尤其是慢性心梗患者，心脏的供血及供氧离不开冠脉微循环系统，常规羰化青染料却不适用于对其进行检测评估。

发明内容

基于此，有必要提供一种Carboxy-DiI类化合物及其制备方法和应用，能够适用于微小动脉血管的检测、评估。

本发明提供一种Carboxy-DiI类化合物，具有如式(I)所示的结构：

其中，R₁、R₄分别独立选自氢、磺酸基、磺酸盐、羧基、羧酸盐、苯甲酸基、苯甲酸盐、苯磺酸基或者苯磺酸盐，R₂和R₃分别独立选自氢、C1-C4烷基或者卤素，R₅和R₆分别独立选自C12-C20烷基，Y^-为一价负离子。

其中一些实施例中，R₂和R₃优选均为氢。R₅和R₆相同，优选C14-C18烷基。Y^-优选自高氯酸根、氯离子、溴离子或者碘离子。

其中一些实施例中，所述Carboxy-DiI类化合物优选自结构如式(II)所示化合物或者结构如式(III)所示化合物：

本发明还提供一种Carboxy-DiI类化合物的制备方法，包括如下步骤：

式(IV)所示化合物与式(V)所示化合物反应，制备获得如式(VI)所示的中间产物M1。

中间产物M1和式(VII)所示化合物反应，制备获得如式(VIII)所示的中间产物M2。

中间产物M2与R₁-B(OH)₂反应，制备获得目标产物，即得。

其中，R₁选自氢、磺酸基、磺酸盐、羧基、羧酸盐、苯甲酸基、苯甲酸盐、苯磺酸基或者苯磺酸盐，R₅选自C14-C18烷基，R₇选自氢或者卤素，Y^-为一价负离子，优选碘离子。

优选地，式(III)所示化合物的合成路如下：

本发明还提供上述任一项所述的Carboxy-DiI类化合物作为水溶性荧光染料在制备发光材料、制备生物荧光探针或者生物荧光成像中的应用。

本发明还提供一种标记检测动脉血管分布的方法，包括如下步骤：采用上述所述的Carboxy-DiI类化合物作为水溶性荧光染料进行心脏灌注，利用多聚甲醛固定和琼脂糖包埋，进行心脏组织切片；利用激光共聚焦显微镜扫描所述心脏组织切片，获得血管3D网络分布图像。