[发明专利]一株Vero单克隆细胞系及其应用

说明书

本发明公开了一株Vero单克隆细胞系及其应用，属于病毒培养和疫苗制备领域。本发明的Vero单克隆细胞系Vero‑TB对PRRSV极其敏感，后者在Vero‑TB中的增殖效率远高于在Marc‑145中的增殖效率。将Vero‑TB培养的PRRSV可用于制备PRRS疫苗，其安全性和有效性俱佳。总之，本发明的细胞系具有十分良好的应用前景。

技术领域

本发明属于病毒培养和疫苗制备领域，特别是涉及一株Vero单克隆细胞系及其应用。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由PRRSV(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus， PRRSV)引起的以母猪发热、厌食、流产、死产、木乃伊胎及弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高病死率为特征的传染病。2006年，我国暴发了高致病性PRRSV(HP-PRRSV)，给我国养猪业造成了严重的经济损失。目前，该病呈世界性分布，给世界养猪业造成了巨大的经济损失。现已被国际兽疫局(OIE)列为B类传染病，我国将其列为二类传染病。

PRRS疫苗是预防、控制PRRS爆发和蔓延的重要工具。现有的疫苗按照抗原类型不同，主要分为重组蛋白疫苗、活病毒减毒疫苗、灭活疫苗等。灭活疫苗和活疫苗是以灭活病毒/活性病毒为抗原，其生产工艺相对简单，产能较大，是目前防控PRRSV的主流疫苗类型。

PRRS灭活疫苗的生产依赖病毒的人工培养增殖，以产生足够多的抗原。 PRRSV增殖条件要求苟刻，人工培养只能在猪肺泡巨噬细胞(PAM)、Marc-145、 CL-2621及CRL等少数细胞中增殖；而猪的肺和呼吸道上皮细胞、心肾的内皮细胞、鸡胚细胞、Vero细胞、BHK-21细胞、MDCK细胞等均不能支持PRRSV 的增殖(王隆柏，PRRSV灭活疫苗安全性与免疫原性的测定及其RT-PCR鉴别检测方法的建立，福建农林大学，2009)。

发明内容

本发明要解决的问题是：提供一种新的可支持PRRSV大量增殖的细胞系。

本发明的技术方案如下：

一株Vero单克隆细胞系，所述细胞系于2020年03月31日被保藏于湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内的中国典型培养物保藏中心 (CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO：C202054，分类命名为：非洲绿猴肾细胞克隆株VERO-TB。

一种PRRSV的培养方法，所述方法是将前述细胞系作为病毒宿主对 PRRSV进行培养。

如前述的培养方法，所述培养包括对所述细胞系附着于微载体进行悬浮培养。

如前述的培养方法，所述PRRSV为CH-1a株。

如前述的培养方法，所述PRRSV为JXA1-R株或TB-PX株。

前述的细胞系或培养方法在制备猪繁殖与呼吸综合征疫苗中的用途。

如前述的用途，所述疫苗是灭活疫苗。

如前述的用途，所述疫苗的抗原为PRRSV的CH-1a株。

如前述的用途，所述疫苗是活疫苗。

如前述的用途，所述疫苗的抗原为PRRSV的JXA1-R株或TB-PX株。

本发明的细胞系对PRRSV具有比传统体外培养PRRSV用的Marc-145细胞更高的敏感性，可提高PRRSV体外效率，进而提高PRRSV活疫苗或灭活疫苗的生产效率，应用前景良好。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。