[发明专利]胆管癌的miRNA标记物及其应用

说明书

本申请提供了用于诊断胆管癌的miRNA标记物及其应用。本申请所提供的miRNA标记物包括miR‑151a‑5p，miR‑191‑5p，以及miR‑4732‑3p中的一种或多种，可用于快速而准确地筛查、预测、诊断或预后胆管癌。

技术领域

本申请属于分子生物学领域，具体涉及用于筛查、预测、诊断或预后胆管癌的miRNA标记物及其应用。

背景技术

外泌体是一种能被机体内大多数细胞分泌的微小膜泡，具有脂质双层膜，直径大约为 30-150 nm。外泌体广泛存在并分布于各种体液中，携带和传递重要的信号分子，形成了一种全新的细胞-细胞间信息传递系统，影响细胞的生理状态并与多种疾病的发生与进程密切相关。

外泌体可以通过作为一种细胞间的交流机制直接促进肿瘤细胞生长、侵袭和迁移，其中包含的miRNA是一类重要的在细胞间传递信息的功能性的分子。通过筛选、鉴别肿瘤细胞分泌的外泌体中的小RNA，可以为肿瘤的早期诊断提供新的线索和更为便捷的手段。

发明内容

本申请发明人通过对胆管癌病人循环血外泌体中miRNA的探索性研究，首次意外发现了可以准确稳定地用作胆管癌筛查、预测、诊断或预后的miRNA分子标记物。

基于此，一方面，本申请提供了用于筛查、预测、诊断或预后胆管癌的试剂盒、微阵列或生物芯片，其包括用于特异性检测选自以下一种或多种miRNA标记物的工具或试剂：miR-151a-5p，miR-191-5p，以及miR-4732-3p。

在具体实施方案中，本申请所提供的试剂盒、微阵列或生物芯片，其中所包括的工具或试剂进一步包括能够特异性检测所述miRNA标记物的引物和/或探针。

在具体实施方案中，标记物miR-151a-5p的引物和/或探针序列为：ucgaggagcucacagucuagu；标记物miR-191-5p的引物和/或探针序列为：caacggaaucccaaaagcagcug；标记物miR-4732-3p的引物和/或探针序列为：gcccugaccuguccuguucug。

另一方面，本申请提供了miRNA标记物在制备用于筛查、预测、诊断或预后胆管癌的试剂盒、微阵列或生物芯片中的用途，其中所述miRNA标记物选自以下一种或多种：miR-151a-5p，miR-191-5p，以及miR-4732-3p。

又一方面，本申请提供了特异性检测miRNA标记物的工具或试剂在制备用于筛查、预测、诊断或预后胆管癌的试剂盒、微阵列或生物芯片中的用途，其中所述miRNA标记物选自以下一种或多种：miR-151a-5p，miR-191-5p，以及miR-4732-3p。

还一方面，本申请提供了特异性检测miRNA标记物的引物和/或探针在制备用于筛查、预测、诊断或预后胆管癌的试剂盒、微阵列或生物芯片中的用途，其中所述miRNA标记物选自以下一种或多种：miR-151a-5p，miR-191-5p，以及miR-4732-3p。

在具体实施方案中，本申请所涉及的miRNA标记物选自以下一种或多种：初始miR-151a-5p，前体miR-151a-5p，成熟miR-151a-5p，初始miR-191-5p，前体miR-191-5p，成熟miR-191-5p，初始miR-4732-3p，前体miR-4732-3p，以及成熟miR-4732-3p。

在具体实施方案中，初始miR-151a-5p，初始miR-191-5p，以及初始miR-4732-3p能够在细胞内被剪切并表达成相应的成熟miR-151a-5p，成熟miR-191-5p，成熟miR-4732-3p；前体miR-151a-5p，前体miR-191-5p，以及前体miR-4732-3p能够在细胞内被剪切并表达成相应的成熟miR-151a-5p，成熟miR-191-5p，成熟miR-4732-3p。