[发明专利]一种HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用有效
| 申请号： | 202010458551.8 | 申请日： | 2020-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN111500626B | 公开（公告）日： | 2021-03-23 |
| 发明（设计）人： | 梁文星;朱明怡;王鲁鲁;宋丽敏 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12N15/55;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司： | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人： | 王晓晓 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 hda3 基因 提高 植物 抵抗 霉菌 侵染 中的 应用 | ||
1.一种HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述HDA3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述植物为番茄。
2.根据权利要求1所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：
（1）构建HDA3基因过表达载体：根据HDA3基因的CDS序列设计引物并进行PCR扩增；扩增产物纯化后，使用限制性内切酶对其进行酶切，回收酶切产物后与质粒进行连接，得到HDA3基因过表达载体；
（2）构建HDA3基因过表达重组菌株：将所述HDA3基因过表达载体转化至农杆菌中，得到HDA3基因过表达重组菌株；
（3）构建HDA3基因过表达植株：将所述HDA3基因过表达重组菌株转化番茄子叶，使用抗生素进行筛选并培养至得到再生苗，即得到HDA3基因过表达植株。
3.根据权利要求2所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述步骤（1）中引物的序列为
HDA3-F：5’-ATGGACTCCTCCACCGTAGACG-3’；
HDA3-R：5’-GGAGATAATATCAGTTGGTTGATC-3’。
4.根据权利要求2所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述质粒为pK7FWG2。
5.根据权利要求2所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述基因过表达载体为pK7FWG2-HDA3。
6.根据权利要求2所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述农杆菌为LBA4404。
7.根据权利要求2所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述步骤（3）中培养的条件为16h光照/8h黑暗；光照温度为26℃；黑暗温度为18℃。
8.根据权利要求2所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，所述HDA3基因过表达植株与野生型植株相比，叶片上的病斑直径明显减小。
9.根据权利要求2所述的HDA3基因在提高植物抵抗灰霉菌侵染中的应用，其特征在于，番茄HDA3基因过表达植株与野生型植株相比，叶片上的灰霉量明显降低。
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