[发明专利]一种斑鳠的人工繁殖方法

权利要求书

1.一种斑鳠的人工繁殖方法，先进行精液冷冻储备，然后在繁殖季节对雌鱼进行催产，并挤出卵粒，再将卵粒与解冻的精液混合受精得到受精卵，最后受精卵孵化，进行苗种培育即可；其特征在于，精液冷冻储备的具体方法如下：

(A)预混液的制备：以重量份计，先边搅拌边将0.2～0.3份月见草油滴加至1份鸡蛋清，搅拌混匀，然后于55～65℃条件下水浴加热5～8分钟，10000～12000r/min搅拌15～20分钟，离心取上清液；再向上清液中加入0.05～0.08份木瓜籽干细胞提取物和0.02～0.04份酵母葡聚糖，超声波振荡均匀，即得所述预混液，备用；

(B)防冻液的制备：以重量份计，先将3～4份质量浓度8～12％甲醛水溶液与0.08～0.12份氯化钠、1份麦芽糖搅拌混合，然后加入约0.2～0.3份预混液，超声波振荡均匀，即得所述防冻液；

(C)然后从雄鱼精巢中采集精子活力90％以上的精液，再将精液与防冻液按照体积比1：15～25混合制成混合液；

(D)分装，密封并平衡处理，液氮熏蒸并保存。

2.根据权利要求1所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(A)中，所述木瓜籽干细胞提取物的制备方法如下：先取成熟木瓜籽，洗净晾干后粉碎成木瓜籽粉末，然后将木瓜籽粉末接种至培养基中，在温度26～30℃和pH＝5.5～6.5条件下培养时间30～35天，后处理，即得所述的木瓜籽干细胞提取物。

3.根据权利要求1所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(C)中，精液采集的具体方法如下：从市场上购买的雄鱼宰杀获得精巢，或直接买回斑鳠雄鱼的精巢；精巢必须饱满，用手捏碎有乳白色的精液流出；精巢带回无菌实验室，用剪刀剪碎，再用匀浆器磨成浆，用吸管吸2～3滴精液放到载玻片上，用清水激活，在显微镜下观察精子的活力，将精子活力大于90％的精液分装到事先准备好的抗冻试管中。

4.根据权利要求1所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(D)的具体方法是：将混合液分装至试管中，每支试管装1mL，密封后在4℃冰箱内平衡30分钟，平衡结束后在液氮上方7cm处熏蒸10分钟，熏蒸结束后放入液氮中保存。

5.根据权利要求1所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，催产的具体方法如下：在繁殖季节，将从野外收集的发育较好的雌鱼或经过人工驯养发育较好的成熟雌鱼作为催产亲鱼，先对催产亲鱼进行催产药物注射，然后放入催产池中，开启进水阀进行冲水，流速控制在0.5m/s以上，水温为24～28℃，水中溶解氧保持在8mg/L以上，pH为7.0～8.2。

6.根据权利要求5所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，采用两针注射法进行催产药物注射，即促黄体素释放激素类似物、鲤鱼脑垂体和绒毛膜促性腺激素的混合物，第一针剂量为每公斤雌鱼注射PG1mg+LRH-A₃ 2μg，第二针剂量为每公斤雌鱼注射PG 6～8mg+LRH-A₃ 6～10μg+HCG 800～1200IU。

7.根据权利要求5所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，所述催产池的准备方法如下：准备一长方形玻璃钢催产池或水泥催产池，水泥催产池底部和池壁贴上瓷砖，安装好进排水管道，做好防逃，在催产池底部放置2～3个容量大于50kg的陶瓷坛，营造仿野外生存环境。

8.根据权利要求1所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，受精卵的获得方法为：将雌鱼捞出用毛巾檫干水分，将卵挤到干燥光滑的塑料盆里，同时将储存在液氮罐中的精液取出放置在清水中6s解冻后倒入塑料盆中，用羽毛轻轻搅动使精卵充分混合，再加入量清水激活，静置1～2分钟完成受精。

9.根据权利要求1所述的一种斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，孵化的具体方法是：先将受精卵用羽毛均匀撒在聚乙烯粘网上，再放进孵化槽内进行流水孵化；孵化时受精卵脱膜前孵化槽内水体交换率为10次/d，脱膜后交换率为5次/d，脱膜后在孵化槽发育至仔鱼鳔充气后即可进行苗种培育。