[发明专利]一种合成单葡萄糖甘油二酯的突变体酶及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202010460058.X | 申请日： | 2020-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN111518784B | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 魏涛;张志平;杨旭;赵彩梦;赵雨哲;黄申;毛多斌;段乃心;王敏;孟祥玉 | 申请（专利权）人： | 郑州轻工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12P19/18;C12P19/02 |
| 代理公司： | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人： | 冉珊敏 |
| 地址： | 450002 *** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 合成 葡萄糖 甘油二酯 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种合成单葡萄糖甘油二酯的突变体酶，其特征在于：所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述的突变体酶在高转化率合成单葡萄糖甘油二酯中的应用，其特征在于，将1 mL突变体甘油糖脂合成酶的酶活标准反应体系：0.1 mM UDP-葡萄糖、0.1 mM甘油二酯、2.0 μM纯化蛋白和50 mM pH 8.5的Tris-HCl反应缓存液，反应温度35℃、200 rpm恒定震荡孵育20小时。
3.权利要求1所述的合成单葡萄糖甘油二酯的突变体酶的制备方法，其特征在于，步骤如下：
（1）海洋细菌
（2）重组质粒的构建：以从步骤（1）培养的海洋细菌
（3）突变体重组质粒的克隆：以pET15b/Agt重组质粒为模板，以上游引物Ⅱ、下游引物Ⅱ为引物进行重叠延伸PCR，将突变体的全长基因克隆到pET15b载体上，得突变体重组质粒；
（4）突变体的纯化：步骤（3）中测序正确的突变体重组质粒经转化、诱导、纯化得突变体。
4.根据权利要求3所述的合成单葡萄糖甘油二酯的突变体酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中上游引物Ⅰ序列如SEQ ID No.3所示、下游引物Ⅰ序列如SEQ ID No.4所示。
5.根据权利要求3所述的合成单葡萄糖甘油二酯的突变体酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中上游引物Ⅱ序列如SEQ ID No.5所示、下游引物Ⅱ序列如SEQ ID No.6所示。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于郑州轻工业大学，未经郑州轻工业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010460058.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：灭弧喷口及具有其的负荷开关
- 下一篇：一种羟甲基氯吡格雷杂质的制备方法
