[发明专利]CD47拮抗剂及其用途

说明书

本发涉及结合CD47抗原的抗体或其抗原结合片段及其制备方法、组合物和应用。本发明的抗体与CD47抗原的相互作用良好，能够用于制备抗CD47抗体药物，可用于治疗和/或预防CD47相关疾病，如癌症。还可用于免疫学检测CD47抗原。

技术领域

本发明涉及生物医学或生物制药技术领域，更具体地涉及人抗CD47的抗体，及其编码序列、制备方法、组合物和应用。

背景技术

CD47也被称为整合素相关蛋白(integrin associated protein，IAP)，是免疫球蛋白超家族成员。CD47广泛的表达于细胞的表面，可与信号调节蛋白α(Signal regulatoryproteinα,SIRPα)、血小板反应蛋白(thrombospondin-1,TSP1)以及整合素(integrins)相互作用，介导凋亡、增殖、免疫等一系列的反应(Maes T,Joos GF,Brusselle GG.Am JRespir Cell Mol Biol.2012；47(3):261-270)。

人体需要20-30trillion的红细胞，以此保持氧气有效的运输到全身各处。红细胞的生命周期较短仅有120天，每小时有100亿的红细胞生成，也有无数衰老的红细胞被巨噬细胞吞噬清除。CD47是细胞表面一个重要的self标记，是调节巨噬细胞吞噬作用的一个重要信号。CD47可以与巨噬细胞表面SIRPα结合，磷酸化其ITIM，随后招募SHP-1蛋白，产生一系列的级联反应抑制巨噬细胞的吞噬作用。年轻的红细胞表达较高的CD47向巨噬细胞释放自己人，别吃我的信号，而衰老的红细胞CD47下调，最终被巨噬细胞所清除。肿瘤细胞有一系列躲避人体免疫系统追杀的方案，包括分泌免疫抑制因子、下调MHC I表达，以及上调PD-L1抑制CD8⁺T细胞活性。聪明的肿瘤细胞当然不会放过CD47这个完美的掩体。不同的研究表明，几乎所有的肿瘤细胞和组织都高表达CD47，是对应正常细胞和组织的3倍。通过CD47这个self信号，肿瘤细胞有效的躲避了巨噬细胞的吞噬作用。肿瘤细胞上调CD47的表达，以此欺骗巨噬细胞。那么通过CD47抗体block这个别吃我的信号，使巨噬细胞发挥吞噬作用。CD47抗体治疗是通过DC细胞和CD8⁺T发挥肿瘤杀伤效应的。DC细胞通过CD47抗体和亲吞噬分子协同作用，吞噬肿瘤细胞，并提呈肿瘤相关抗原给CD8⁺T，进而发挥CD8⁺T对肿瘤的特异性杀伤作用。

然而，目前在临床中或上市的CD47抗体，在抗体亲和力，免疫原性，副作用，抗肿瘤作用等方面仍存在不足，因此，亟待效果更佳的该靶点候选抗体开发。

发明内容

本发明提供具有特异性结合CD47抗原的抗体及其制备方法和应用。

为实现上述目的，本发明提供了结合人CD47的抗体或其抗原结合片段。本发明所述抗体或其抗原结合片段是指脱离人体或动物体的抗体或抗原结合片段，即分离的抗体或其抗原结合片段。

在本发明的一个方面中，所述抗体或其抗原结合片段包括轻重链互补决定区(CDR)，所述CDR区选自以下任一组氨基酸序列：

1)SEQ ID NOs:11-13所示的轻链互补决定区CDR1-CDR3和/或SEQ ID NOs:14-16所示的重链互补决定区CDR1-CDR3；

2)SEQ ID NOs:19-21所示的轻链互补决定区CDR1-CDR3和/或SEQ ID NOs:22-24所示的重链互补决定区CDR1-CDR3；

3)SEQ ID NOs:27-29所示的轻链互补决定区CDR1-CDR3和/或SEQ ID NOs:30-32所示的重链互补决定区CDR1-CDR3。