[发明专利]针对新型冠状病毒NP蛋白的抗体及其检测应用

说明书

本发明公开了针对新型冠状病毒NP蛋白的抗体及其检测应用，所述抗体包含抗体轻链可变区的抗原互补决定区CDR1，CDR2和CDR3分别为SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：6及SEQ ID NO：7的氨基酸序列；抗体重链可变区的抗原互补决定区CDR1，CDR2和CDR3分别为SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：3的氨基酸序列。本发明还公开了该抗体的制备过程及该抗体重链可变区与轻链可变区氨基酸序列。

技术领域

本发明属于细胞免疫学、分子生物学领域，涉及针对新型冠状病毒NP蛋白的抗体及其检测应用。

背景技术

国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2，世界卫生组织将感染此病毒引起的肺炎称为COVID-19。此病毒传染性强，传播途径广。该病毒能迅速适应人体环境，感染后在潜伏期即具有传播能力，同时还有一些无症状感染者报道，甚至在多种动物体内也检测到病毒核酸。这些因素使得对该病毒的防控变的非常复杂，而且目前没有有效治疗药物及疫苗上市。

SARS-CoV-2属于冠状病毒属，为单股正链RNA病毒，大小约30kb，与SARS-CoV相似性为79％，与蝙蝠体内分离的冠状病毒(Coronavirus，CoV)相似性最高约88％。SARS-CoV-2具有典型的冠状病毒特征，病毒包膜上有典型的棘突，形似日冕。核衣壳为螺旋对称型，主要结构蛋白是核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,NP)，NP全长420个氨基酸。NP在病毒结构蛋白中含量最多，在宿主感染早期大量表达，且免疫原性较强，能引起宿主强烈的免疫应答。因此，NP可作为SARS-CoV-2感染血清学诊断的主要靶标抗原。

由于特异性治疗药物及有效疫苗尚未研发成功，早期诊断成为防控疫情重要的措施，早期核酸诊断及临床诊断为确诊重要依据。虽然核酸诊断速度快，受采样的质量的影响大，存在假阳性和假阴性，影响防控措施的落实。部分无症状感染者在病程晚期核酸检测也呈阴性，单凭核酸检测很容易出现漏诊。血清学诊断是检测病原感染后机体的免疫反应，持续时间长，免疫反应稳定，且免疫反应随着病程进展呈动态变化趋势。因此，血清学诊断同样也是早期诊断和感染现状评价的的重要手段。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供一种抗新型冠状病毒的单克隆抗体或其衍生体如抗体Fab片段、单链抗体等。

本发明要解决的技术问题之二是提供编码上述抗体的DNA分子或基因。

本发明要解决的技术问题之三是提供制备上述抗体的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

在本发明第一方面，提供了一种抗新型冠状病毒的单克隆抗体或其衍生体，其包含第一可变区和第二可变区，其中所述第一可变区是抗体轻链可变区，其抗原互补决定区CDR1，CDR2和CDR3分别包含SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：6及SEQ ID NO：7所示的氨基酸序列；其中所述第二可变区是抗体重链可变区，其抗原互补决定区CDR1，CDR2和CDR3分别为SEQIDNO：1，SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列；

所述单克隆抗体的衍生体包括抗体Fab片段、单链抗体、双特异抗体(bi-specific)等。

作为本发明的优选的技术方案，所述第一可变区是抗体轻链可变区，为SEQ IDNO：8所示的氨基酸序列；其所述第二可变区是抗体重链可变区，为SEQ IDNO：4所示的氨基酸序列。

作为本发明的优选的技术方案，其包含所述抗体轻链可变区和人抗体轻链恒定区，以及所述抗体重链可变区和人抗体重链恒定区的铰链区，CH1区，CH 2区和CH3区。

作为本发明的优选的技术方案，所述人抗体轻链恒定区来自人抗体kappa链或抗体lamda链，所述人抗体重链恒定区来自人IgG1，IgG2，IgG3或IgG4亚型。