[发明专利]一种重组型超氧化物歧化酶及其编码基因和制备方法

说明书

本发明属于有机物分离纯化领域，具体涉及一种重组型超氧化物歧化酶(简称重组型SOD)及编码所述重组型SOD的基因和相关的表达载体、转基因细胞系和宿主菌，以及所述重组型SOD的制备方法，所述重组型SOD的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.4所示，所述编码重组型SOD的基因的基因序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。本发明所述重组型SOD经试验检验，具有极好的热稳定性、极好的酸碱耐受性和较好的常用防腐剂耐受性，可以广泛应用于医药、化妆品和食品领域。

技术领域

本发明属于有机物分离纯化领域，具体涉及一种重组型超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)及其编码基因和制备方法。

背景技术

自由基自1900年MosesGomberg发现它与生命活动密切相关后，已经成为生命科学的研究热点。1956年由Denham Harman根据射线损伤存在自由基增加的现象，将自由基的概念引入生命科学，提出自由基衰老假说。在正常生命过程中，体内的自由基为维持生命活动不断产生，但也在不断被清除，使自由基维持正常水平。自由基过多会导致多种疾病，如肿瘤、动脉粥样硬化、心肌梗塞、糖尿病、白内障、炎症、缺氧或缺血性损伤、脑卒中、溃疡和老年斑等。自由基的产生是引起或加剧发炎症状最主要的原因。中性粒细胞具有吞噬和杀灭细菌的功能，在机体内起着重要的防御作用，但在抗感染过程中释放大量自由基。首先当中性粒细胞被激活时，细胞膜上的NADPH氧化酶也被激活，将还原型NADPH的一个电子传递给氧分子而形成O₂^-，大量中性粒细胞的趋化、激活产生大量的氧自由基，过剩的氧自由基如不能及时分解则会渗入细胞周围，破坏正常细胞，从而使炎症加剧。

根据与酶活性中心结合的金属离子的不同，超氧化物歧化酶SOD主要可分为三种：Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD。Cu/Zn-SOD分布最广，主要存在于真核细胞的细胞质中。Mn-SOD在真核生物以及原核生物的线粒体中都有。Fe-SOD主要存在于原核生物中。SOD广泛存在于生物体的各个组织中，能够有效的清除氧自由基，治疗炎症。其中性质最为稳定，毒性最小的是Mn-SOD。

在正常生理条件下，大约有2％的氧在线粒体中生成活性氧自由基。生命的进化使细胞发展了有效的抗氧化防御机制，各种抗氧化酶是一个重要的防御体系，如广泛分布的SOD就起着重要的防御作用。活性氧的产生能刺激抗氧化防御机制增高活性以对抗活性氧的伤害，但是活性氧一旦生成过快过量还是会受到伤害，从而产生炎症等各种疾病，过度损伤的细胞将通过凋亡机制被清除以维持机体的正常生命活动。而位于线粒体的Mn-SOD正是去除氧自由基的第一道防线，它的活性影响到氧自由基的清除效率和细胞的炎症的消退效率。

尽管SOD已经被证明具有非常好的功效，但是目前还很难有实际的应用，主要是由于SOD在耐高温、耐酸碱性、耐防腐剂等方面存在一定缺陷，极大的限制了SOD在医药、化妆品和食品领域的发展和应用。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术问题的不足，提供了一种新的重组型超氧化物歧化酶及其编码基因和制备方法。

为了实现上述发明的一方面的目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供一种重组型超氧化物歧化酶，其氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。

重组型超氧化物歧化酶，简称重组型SOD。

为了实现上述发明的又一方面的目的，本发明提供以下技术方案：

一种编码所述重组型超氧化物歧化酶的基因，其基因序列为序列表中SEQ IDNO.3所示的DNA序列。

为了实现上述发明的又一方面的目的，本发明提供以下技术方案：