[发明专利]CD177在制备诊断胆道闭锁的产品中的应用

说明书

本发明提供了一种CD177在制备诊断胆道闭锁的产品中的应用，涉及分子诊断技术领域，本发明通过检测大量的胆道闭锁患儿样本，并结合动物实验，首先证实了胆道闭锁外周血和肝脏组织中的CD177+中性粒细胞的数量可作为评估肝损伤程度的有力指标，因此检测CD177基因、CD177蛋白或CD177+中性粒细胞均可作为临床上评估胆道闭锁患儿的病情提供更方便、直接、准确的方法。本发明还证实了CD177在胆道闭锁中具有促炎的作用，其抑制剂可用于治疗胆道闭锁的药物研发。

技术领域

本发明涉及分子诊断技术领域，尤其是涉及一种CD177在制备诊断胆道闭锁的产品中的应用。

背景技术

胆道闭锁(biliary atresia，BA)是以新生儿黄疸为主要表现的胆管阻塞性疾病，预后差，病死率高，病因及发病机制尚不明确。BA的基本病理特点为肝内外胆管进行性炎症、胆管闭锁和肝纤维化。其肝纤维化的进展比其他成人疾病发展快且侵袭性强，即使Kasai手术能缓解部分BA患儿的胆汁淤积症状，然而大多数患儿仍因后续的肝内胆管进行性破坏，甚至肝衰竭，成为危及患儿生命的严重疾病。我国是BA的高发地区，发病率高达1.5/10,000。由于目前缺乏相关的早期筛查方法及有效的临床治疗药物，BA患儿常常在出生后1-4月时才被确诊，大多数患儿因无法实施肝脏移植而于2岁内因肝衰竭而死亡。因此，寻找BA早期诊断方法极其重要。

目前胆道闭锁诊断方法较多，但特异性均较差，其方法包括：

(1)血清胆红素的动态观察：每周测定血清胆红素，如胆红素量曲线随病程趋向下降，则可能是肝炎；若持续上升，提示为胆道闭锁，但重型肝炎并伴有肝外胆道阻塞时，亦可表现为持续上升，此时则鉴别困难；

(2)超声检查：若未见胆囊或见有小胆囊(1.5cm以下)，则疑为胆道闭锁，若见有正常胆囊存在，则支持肝炎，如能看出肝内胆管的分布形态，则更能帮助诊断；

(3)99mTc-diethyl iminodiacetic acid(DIDA)排泄试验：近年已取代131碘标记玫瑰红排泄试验，有较高的肝细胞提取率(48％～56％)，优于其他物品，可诊断由于结构异常所致的胆道部分性梗阻，如胆总管囊肿或肝外胆管狭窄，发生完全梗阻时，则扫描不见肠道显影，可作为重症肝内胆汁郁积的鉴别，在胆道闭锁早期时，肝细胞功能良好，5分钟显现肝影，但以后未见胆道显影，甚至24小时后亦未见肠道显影，当新生儿肝炎时，虽然肝细胞功能较差，但肝外胆道通畅，因而肠道显影；

(4)脂蛋白-X(Lp-x)定量测定：脂蛋白-X是一种低密度脂蛋白，在胆道梗阻时升高，据研究所有胆道闭锁病例均显升高，且在日龄很小时已呈阳性，新生儿肝炎病例早期呈阴性，但随日龄增长也可转为阳性，若出生已超过4周而Lp-X阴性，可除外胆道闭锁；如500mg/dl，则胆道闭锁可能性大，亦可服用消胆胺4g/天，共2～3周，比较用药前后的指标，如含量下降则支持新生儿肝炎综合征的诊断，若继续上升则有胆道闭锁可能；

(5)胆汁酸定量测定：最近应用于血纸片血清总胆汁酸定量法，胆道闭锁时血清总胆汁酸为107～294μmol/L，一般认为达100μmol/L都属郁胆，同年龄无黄疸对照组仅为5～33μmol/L，平均为18μmol/L，故有诊断价值，尿内胆汁酸亦为早期筛选手段，胆道闭锁时尿总胆汁酸平均为19.93±7.53μmol/L，而对照组为1.60±0.16μmol/L，较正常儿大10倍；

(6)肝穿刺病理组织学检查：一般主张作肝穿刺活检，或经皮肝穿刺造影及活检，新生儿肝炎的特征是小叶结构排列不整齐，肝细胞坏死，巨细胞性变和门脉炎症，胆道闭锁的主要表现为胆小管明显增生和胆汁栓塞，门脉区域周围纤维化，但有的标本亦可见到多核巨细胞，因此，肝活检有时能发生诊断困难，甚至错误，有10～15％病例不能凭此作出正确诊断；而且肝穿刺活检属于有创检查；