[发明专利]一种控蚜剂、RNAi与球孢白僵菌联合应用控蚜的方法

说明书

本发明涉及害虫防治和基因工程技术领域，公开了一种控蚜剂：包含蚜虫的dsRNA与球孢白僵菌孢子；还公开了一种RNAi与球孢白僵菌联合应用控蚜的方法，是采用所述的控蚜剂处理植株防治蚜虫。本发明将生防真菌和RNAi技术联合应用开发出一种新型的控蚜剂，该控蚜剂有显著的增效机制，能克服单独使用真菌或RNAi技术控蚜的缺陷，控蚜能力能达到80％。使用该控蚜剂直接在田间对农作物进行喷雾处理即可有效防治蚜虫。本发明适用范围广，只需要合成蚜虫的不同目标基因的dsRNA，就可以将相应的dsRNA与球孢白僵菌的孢子悬浮液混合一起进行喷雾处理，该方法可广泛应用于豌豆蚜、桃蚜以及褐色桔蚜等蚜虫。

技术领域

本发明涉及害虫防治和基因工程技术领域，具体涉及一种控蚜剂、RNAi与球孢白僵菌联合应用控蚜的方法。

背景技术

蚜虫对植物的危害包括直接取食和传播病毒两个方面。目前，蚜虫的危害和抗药性在生产中日益严重，亟需研发新型控蚜策略和技术。球孢白僵菌Beauveria bassiana是一种应用广泛的生防微生物，其具有寄主范围广、防控毒力强等特点，在害虫防控中极具应用潜力。其中，球孢白僵菌在玉米螟、松毛虫上应用最为广泛。

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是近年来得到广泛使用的一种重要基因沉默手段，是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(dsRNA)诱发的、同源RNA高效特异性降解的现象，是通过dsRNA的介导特异性的降解对应序列的mRNA。由于使用RNAi技术可以特异性抑制特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和基因治疗领域。RNAi技术因特异性强、无污染、基因靶标多等优势，具有开发为“新一代杀虫剂”的潜力。

目前一般是单独采用白僵菌或者RNAi技术进行害虫防控，单独使用白僵菌存在真菌本身见效缓慢的问题。单独使用其中一种防治方法效果欠佳，未见有将两者联合起来防治蚜虫的报道。

发明内容

本发明的目的是针对上述问题，提供一种控蚜剂、RNAi与球孢白僵菌联合应用控蚜的方法。

本发明为了实现其目的，采用的技术方案是：

一种控蚜剂，包含蚜虫的dsRNA与球孢白僵菌孢子。

所述控蚜剂是蚜虫的dsRNA溶液与球孢白僵菌孢子悬浮液的混合溶液。

优选地，所述蚜虫的dsRNA是指蚜虫的gene4714基因、gene15782基因、gene20844基因中的一个或多个基因对应的dsRNA或多个dsRNA组合。

优选地，所述蚜虫是指豌豆蚜或桃蚜或褐色桔蚜。

进一步优选地，所述的dsRNA为Apds15782或Apds20844或Apds4714或Apds4714+Apds15782或Apds15782+Apds20844或Apds4714+Apds20844或Mpds4714+Mpds15782或Acds4714+Acds15782。

一种RNAi与球孢白僵菌联合应用控蚜的方法，是采用上述任一所述的控蚜剂处理植株防治蚜虫。

优选地，是采用上述的控蚜剂对植株进行喷雾处理，防治蚜虫。

本发明的有益效果是：本发明将生防真菌和RNAi技术联合应用开发出一种新型的控蚜剂，该控蚜剂有显著的增效机制，能克服单独使用真菌或RNAi技术控蚜的缺陷，控蚜能力能达到80％。使用该控蚜剂直接在田间对农作物进行喷雾处理即可有效防治蚜虫。本发明适用范围广，只需要合成蚜虫的不同目标基因的dsRNA，就可以将相应的dsRNA与球孢白僵菌的孢子悬浮液混合一起进行喷雾处理，该方法可广泛应用于豌豆蚜、桃蚜以及褐色桔蚜等蚜虫。

附图说明

图1是豌豆蚜Apgene4714、Apgene20844、Apgene15782单基因干扰与球孢白僵菌联合控蚜实验的豌豆蚜存活率曲线。