[发明专利]辣椒细胞质雄性不育恢复基因相关InDel标记D6-26、特异性引物及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关InDel标记D6‑26、特异性引物和应用。本发明的辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关InDel标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，SEQ ID No.1所示序列的第64位碱基C后或插入4个碱基ATCT。本发明不需通过辣椒测交和育性表型鉴定，只是利用待测材料的DNA进行PCR和聚丙烯凝胶电泳检测，就可以判断该辣椒材料为保持系还是恢复系，可以广泛应用于分子标记辅助育种。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关InDel标记D6-26、特异性引物和应用。

背景技术

辣椒是我国重要的蔬菜作物，生产上应用的辣椒品种，其中90％以上为杂交一代，主要采用人工去雄授粉杂交，制种成本较高，且往往存在纯度风险，利用辣椒雄性不育系制种是解决此问题的一条有效途径。

利用辣椒细胞核核雄性不育系配制杂交种可以省去人工去雄环节，但母本群体中约有一半的可育株须在花期拔除，一定程度上造成了田地浪费，并影响单产。而选用辣椒细胞质雄性不育系做母本，母本群体中全部为不育植株，较细胞核雄性不育系利用具有成本和产量优势。

辣椒以果实为产品，通常情况下良好的授粉、受精是辣椒果实发育的前提条件，若受精不良，则不能坐果，或者果实不能膨大至正常水平，严重影响辣椒品质和产量。因此，稳定的恢复系的选育就成为辣椒细胞质雄性不育三系育种的关键。恢复系转育过程中需要表型选择、回交和测交评价，转育出目标性状优良的稳定恢复系也比较费时、费力。

研究表明，不同的辣椒细胞质雄性不育恢复系，其恢复基因可能不同。虽然目前已经开发了大量与辣椒细胞质雄性不育恢复性相关的分子标记，但这些分子标记都存在标记和表型不一致以及低适用性等问题。因而针对不同恢复系材料，开发与其恢复基因紧密连锁的分子标记，有助于提高分子标记辅助选择辣椒细胞质雄性不育恢复系的效率和效果。

发明内容

本发明的目的在于提供辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关InDel标记D6-26。

本发明的再一目的在于提供上述InDel标记D6-26PCR的特异性引物。

本发明的再一目的在于提供上述InDel标记D6-26的应用。

本发明的再一目的在于提供筛选辣椒细胞质雄性不育恢复系的方法。

根据本发明具体实施方式的辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关InDel标记D6-26，所述InDel标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其中，SEQ ID No.1所示序列的第64位碱基C后或插入4个碱基ATCT。

SEQ ID No.1

CTACTGGTGGGTTATAGTAGGCGCCATCATGTCCTGAAAAGTTGGGTCGTGACACTATCTCTT[CATCT/C]

ATCTTTCTTAAGAGTAAATAATGAATAGTCGTGAATACTTTGACAAAAACTAGCATCTAAAAGGGAAGA

C碱基位于参考基因组CM334 v1.55第4677900位。

根据本发明具体实施方式的辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关InDel标记D6-26的特异性引物的序列如下：

上游引物:5′-CTACTGGTGGGTTATAGTAGGC-3′，

下游引物:5′-TCTTCCCTTTTAGATGCTAGTT-3′，

本发明还提供辣椒细胞质雄性不育恢复性状相关InDel标记的应用，尤其是在辣椒分子标记辅助育种中的辣椒细胞质雄性不育恢复系筛选中的应用。