[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒检测引物、试剂盒及其应用在审
申请号: | 202010471892.9 | 申请日: | 2020-05-29 |
公开(公告)号: | CN111440902A | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 刘忠华;梁文清;陈湘;司广斌 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 广州独角熊知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 44580 | 代理人: | 张小黎 |
地址: | 510642 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 流行性 腹泻 病毒 检测 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种猪流行性腹泻病毒检测引物,其特征在于,所述引物包括:
上游引物:5'-GGTGAGCGAATTGAACAACCTTCIIIIIGGCATTTC-3'(SEQ ID NO.1),
下游引物:5'-GACCCTGGTTATTTCCACGATTCTIIIIITTACCAC-3'(SEQ ID NO.2),
其中,I表示次黄嘌呤核苷。
2.一种猪流行性腹泻病毒检测试剂盒,其特征在于,包括SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的上下游引物,还包括阳性质控品、阴性质控品。
3.如权利要求2所述的猪流行性腹泻病毒检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒反应体系中上下游引物反应终浓度为0.025~0.6μM。
4.如权利要求2所述的猪流行性腹泻病毒检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒反应条件包括:
5.如权利要求2所述的猪流行性腹泻病毒检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒检测敏感性可达6.84×103copies/μL。
6.如权利要求2所述的猪流行性腹泻病毒检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒可在样品中特异性鉴定出猪流行性腹泻病毒,其中,所述样品包含有猪传染性胃肠炎病毒、猪急性腹泻综合征冠状病毒、猪德尔塔冠状病毒、猪轮状病毒、猪呼吸道冠状病毒病和猪塞内加谷病毒中的一种或多种。
7.一种猪流行性腹泻病毒检测方法,包括以下步骤:
1)从待检样品中提取核酸;
2)以步骤1)所得核酸为扩增模板,利用权利要求1所述的引物,进行RT-PCR扩增,得到扩增产物;
3)扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,获得检测结果。
8.如权利要求1所述的一种猪流行性腹泻病毒检测引物、如权利要求2所述的一种猪流行性腹泻病毒检测试剂盒或如权利要求7所述的一种猪流行性腹泻病毒检测方法在检测猪流行性腹泻病毒中的应用。
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