[发明专利]一种精子分离液及其制备方法

说明书

本发明提出了一种精子分离液，其特征在于，包括以下组分：13±1mM NaHCO₃，0.36±0.02mM KH₂PO₄，0.32±0.02mM C₃H₃O₃Na，17±1mM C₃H₅O₃Na，0.5±0.1mM C₆H₁₂O₆，20±0.5mM HEPES，0.1±0.05mM谷胱甘肽，0.51±0.06mM维生素C，0.21±0.02mM维生素E，0.07±0.02mMβ‑胡萝卜素，0.82±0.09mM儿茶酚，100±5mM NaCl，4.6±0.2mM KCl，0.2±0.01mM MgSO₄·7H₂O和2.0±0.1mM CaCl₂·2H₂O，5mg/L庆大霉素，5g/L人血清白蛋白，以及80％体积比或40％体积比硅烷包裹的胶体二氧化硅溶液，以注射用水溶解。本发明通过向精子分离液中加入谷胱甘肽、维生素C以及维生素E等抗氧化剂，能够避免精液和分离液中的氧化物质使精子产生氧化应激反应，保证了精子的活力。

技术领域

本发明涉及精子分离领域，尤其涉及一种精子分离液及其制备方法。

背景技术

具有正常精液指标但不孕的男性最常见的原因是精子DNA不正常，受精能力不仅取决于精子的绝对数量，还决定于精子的功能。精子的运动能力是精子受精能力的可靠指标，在辅助生殖(ART)中，精液中可分离的运动精子数量直接影响不孕的治疗方案。分离操作过程和分离试剂会导致精子产生氧化损伤，氧化损伤是影响精子运动能力和功能，进而影响后续辅助生殖的结局。精子密度梯度分离是常用的辅助生殖体外操作技术，密度梯度分离可以将精液中的白细胞、上皮细胞、死精、畸形或未成熟精子及细胞碎片有效去除，但同时也会导致精子的氧化损伤。

发明内容

本发明克服现有技术存在的缺陷，提出了一种具有临床应用前景的精子分离液，保证精子的活力和DNA完整性。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种精子分离液，包括以下组分：13±1mM NaHCO₃，0.36±0.02mM KH₂PO₄，0.32±0.02mM C₃H₃O₃Na，17±1mM C₃H₅O₃Na，0.5±0.1mM C₆H₁₂O₆，20±0.5mM HEPES，0.1±0.05mM谷胱甘肽，0.51±0.06mM维生素C，0.21±0.02mM维生素E，0.07±0.02mMβ-胡萝卜素，0.82±0.09mM儿茶酚，以注射用水溶解。

进一步地，所述精子分离液中还包括100±5mM NaCl，4.6±0.2mM KCl，0.2±0.01mM MgSO₄·7H₂O和2.0±0.1mM CaCl₂·2H₂O。

进一步地，所述经精子分离液中还包括5mg/L庆大霉素，5g/L人血清白蛋白，以及80％体积比或40％体积比硅烷包裹的胶体二氧化硅溶液。

本发明采用的另一技术方案是：一种精子分离液的制备方法，包括以下步骤：