[发明专利]NASBA技术双重检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸试剂盒及其检测方法

说明书

本发明涉及一种病原体检测领域，是一种NASBA技术双重检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸试剂盒及其检测方法，其特点是根据寨卡病毒和基孔肯雅病毒NS3基因序列设计特异性扩增引物，利用NASBA反应体系同时检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸。能实现对寨卡病毒和基孔肯雅病毒同时快速、灵敏、特异、准确的检测。

技术领域

本发明涉及一种病原体检测领域，具体涉及一种以NS3基因为基础的NASBA技术双重检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸试剂盒及其检测方法。

背景技术

蚊媒传染病是一组以蚊类为媒介而传播的疾病，包括登革热、基孔肯雅热和寨卡病毒病等，严重威胁着人类健康。登革热是一种在全球热带和亚热带发现的蚊媒传染病，目前在100多个国家流行。最新研究显示，每年有3.9亿例登革热感染，其中9600万出现临床症状，全球有39亿人面临登革热病毒感染风险。基孔肯雅热是由受感染的蚊类传播给人类的疾病，在亚洲、非洲、欧洲以及美洲的近60个国家传播，2016年共向泛美卫生组织区域办事处报告发生近35万病例和15万实验室确诊病例。寨卡病毒病也是一种由蚊媒传播的疾病，据WHO美洲区域办事处数据显示，自2015年5月巴西出现寨卡病毒传播以来，美洲48个国家和地区报告了53.2万例寨卡病毒感染病例，其中17.5万例为确诊病例，并且22个国家和地区报告了2400余例与寨卡病毒感染相关的先天性综合征。鉴于蚊媒传染病的严重性，灵敏、准确、有效的诊断蚊媒传染病对疾病的预防和治疗有重要意义，对采取正确的防控策略来降低蚊媒传染病的传播有重要作用。

本发明设计一种以NS3基因为基础的NASBA技术双重检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸试剂盒及其检测方法，同时、灵敏、准确、可测低滴度寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸，能有效应用于口岸蚊媒传染病的检测，为口岸提供坚实的技术支持和技术储备。

发明内容

针对寨卡病毒和基孔肯雅病毒的实际需求，本发明提供一种以NS3基因为基础的NASBA技术双重检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸试剂盒，其特点是根据寨卡病毒和基孔肯雅病毒NS3基因序列设计特异性扩增引物，利用NASBA反应体系同时检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸。能实现对寨卡病毒和基孔肯雅病毒同时、快速、灵敏、特异、准确的检测。并提供其检测方法。

本发明是由以下技术方案来实现的：

本发明设计了一组以NS3基因为基础的NASBA技术同同时检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸序列特异性扩增引物，序列如下：

寨卡病毒扩增引物

F：AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGTGCTTCGAGCCTTCG

R：TTCAGCAGCGACAACCCTGGTTGG。

基孔肯雅病毒扩增引物

F：AATTCTAATACGACTCACTATAGGGTGCGGTACATATCCAGTAA

R：TCCTTGTCTCGGCAGTAG。

本发明设计了一种以NS3基因为基础的NASBA技术双重检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒核酸试剂盒，它包括如下成分：

1）寨卡病毒和基孔肯雅病毒NS3基因序列检测特异性扩增引物

寨卡病毒扩增引物

F：AATTCTAATACGACTCACTATAGGGAGTGCTTCGAGCCTTCG

R：TTCAGCAGCGACAACCCTGGTTGG。

基孔肯雅病毒扩增引物

F：AATTCTAATACGACTCACTATAGGGTGCGGTACATATCCAGTAA

R：TCCTTGTCTCGGCAGTAG。