[发明专利]日本血吸虫SjGST基因的 siRNA 及其应用

说明书

本发明公开了日本血吸虫SjGST基因的siRNA，具体的siRNA为：SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。本发明还公开了日本血吸虫SjGST基因的siRNA的应用。本发明的日本血吸虫SjGST基因的siRNA，可明显抑制SjGST基因的转录，并能显著降低血吸虫感染小鼠的肝脏荷卵数和虫卵孵化率，对血吸虫体被结构造成了一定的损伤，并造成生殖细胞的形态异常，适用于制备治疗血吸虫病的药物。

技术领域

本发明涉及分子生物学和生物医药技术领域，尤其涉及一种日本血吸虫SjGST基因的siRNA 及其应用。

背景技术

血吸虫病(Schistosomiasis)是一种分布广泛、危害严重的人畜共患寄生虫病，呈地方性流行；血吸虫性成熟雌虫产生的大量虫卵在动物肝脏中形成的肉芽肿是导致宿主损伤的根本原因，而大量虫卵排出体外又造成血吸虫病的传播和流行。目前，主要采用药物，例如吡喹酮，对已经感染血吸虫病的人或动物进行治疗，但是这些药物不能够防治血吸虫病的再次感染，因此，有必要寻找新的治疗血吸虫病的药物。此外，抗原伪装和抗原模拟是血吸虫免疫逃避的重要机制，这也是没有一种安全性高、特异性强的疫苗可以广泛应用于控制血吸虫病的原因，故研究有效的抗原靶点对血吸虫疫苗、药物靶标和诊断工具的开发方面具有潜在应用价值。

SjGST是谷胱甘肽-S-转移酶的同工酶。谷胱甘肽-S-转移酶是一种具有多种生理功能的基因家族。谷胱甘肽-S-转移酶根据生化和免疫学特征可分为a、 u、π等3类同工酶，该酶具有与蛋白质结合的解毒功效，其中π可作为肿瘤标记物，该酶还可作为“癌前”的病变标志。SjGST利于谷胱甘肽和疏水蛋白结合在雌虫生殖中极其重要。日本血吸虫SjGST基因（SjGST），其基因序列在GenBank中的编号为FN315687.1。

RNA干扰（RNAi）是发生在mRNA水平上的一种基因沉寂现象，即将外源性双链RNA（dsRNA）引入细胞后可以引起细胞内与其同源的mRNA特异性降解，使该基因在RNA水平上被关闭而致其不表达，即转录后基因沉寂，从而产生相应的功能表型缺失。该技术目前已经在功能基因组学、基因治疗、微生物学研究和药物研发等领域里取得了令人瞩目的进展。小分子干扰RNA（small interfering RNAs，siRNAs），是一种短片段双链RNA分子，通常由20个左右核苷酸组成，能够以同源互补序列mRNA为靶标并将其降解，从而介导特异性RNA干扰途径的能进行的，使转录后基因沉默。siRNA已经广泛应用于基因表达调控机制研究等领域。

发明内容

在前期研究工作中，通过qRT-PCR技术验证了SjGST在正常发育雌虫与发育阻遏雌虫的表达，结果显示SjGST在双性感染雌虫中表达较高，表明SjGST在雌虫发育过程中起着一定的作用。研究SjGST基因的功能及其在雌虫中的作用将对于我们从控制雌虫生殖发育及产卵的角度来控制血吸虫病奠定基础。

因此，本发明要解决的技术问题是提供一种日本血吸虫SjGST基因的 siRNA，该siRNA抑制SjGST基因的转录，可用于制备治疗血吸虫病的药物。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现:

本发明首先提供一种干扰日本血吸虫SjGST基因的siRNA。更具体地，所述的siRNA，其特征在于，其序列为 SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。

其次，本发明提供一种干扰日本血吸虫SjGST基因的siRNA。更优选地，其正义链序列为 SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列,反义链序列为SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。