[发明专利]小麦TaRDR6基因及其在雄性不育中的应用

权利要求书

1.一种利用小麦TaRDR6基因构建雄性不育的小麦植株的方法，其特征在于，降低或沉默小麦中小麦TaRDR6基因的表达；所述小麦TaRDR6基因位于第三号染色体的3B和3D上，分别命名为TaRDR6-3B和TaRDR6-3D，所述TaRDR6-3B的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述TaRDR6-3D的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述降低或沉默小麦中小麦TaRDR6基因的表达，具体包括如下步骤：

1）设计靶向TaRDR6基因的sgRNA；所述的TaRDR6基因的sgRNA的核苷酸序列SEQ IDNO.3所示；

2）根据步骤1）获得的sgRNA设计sgRNA的扩增引物进行PCR扩增，获得扩增产物；

3）利用步骤2）获得的扩增产物和pBUE411载体构建具有敲除小麦TaRDR6基因功能的pBUE411-RDR6双元载体；

所述的具有敲除小麦TaRDR6基因功能的pBUE411-RDR6双元载体，包括表达盒A和表达盒B；

所述表达盒A自上游至下游具体依次包括如下元件：来自小麦的TaU3启动子A、所述TaRDR6基因的sgRNA和终止子A；所述启动子A的序列如SEQ ID NO.5所示；所述终止子A序列如SEQ ID NO.7所示；

所述表达盒B自上游至下游依次具体包括如下元件：启动子B、玉米Cas9编码序列和终止子B；所述启动子B序列如SEQ ID NO.6所示；所述玉米Cas9编码序列如SEQ ID NO.4所示；所述终止子B序列如SEQ ID NO.8所示；

4）利用农杆菌介导将步骤3）获得的双元载体转化入植物中，降低或沉默小麦TaRDR6基因的表达，即可获得花粉败育的小麦植株。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述表达盒A位于所述表达盒B的上游，表达盒A和表达盒B相互串联。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述pBUE411-RDR6双元载体还含有抗性标记基因；所述pBUE411- RDR6双元载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）中所述的sgRNA的扩增引物为RDR6-gR1-TaU3-F和RDR6-gR1-TaU3-R，RDR6-gR1-TaU3-F序列如SEQ ID NO.10所示，RDR6-gR1-TaU3-R序列如SEQ ID NO.11所示。