[发明专利]一种基于尖晶石型锰铁氧体的夹心型光电化学免疫传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种基于尖晶石型锰铁氧体的夹心型光电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将ITO导电玻璃切割成2.5×1.0 cm²，依次用去污粉、丙酮、乙醇和超纯水超声清洗0.5 h，氮气下吹干；

2）取6 µL、1 ~ 6 mg/mL的锌掺杂硫化镉修饰的尖晶石结构锰铁氧体MnFe₂O₄/Zn_0.1Cd_0.9S溶液滴加到ITO导电玻璃的导电面，室温下晾干；

3）将以上修饰的电极在浓度为1% ~ 5%的氯金酸溶液中以-0.2 V电镀30 s，在电极表面沉积金膜；

4）在修饰电极表面滴加1 ~ 5 mg/mL的降钙素原（PCT）Ab₁溶液，4 ^oC下孵化1 h后超纯水清洗，自然晾至湿润薄膜状态；

5）滴加6 µL、质量分数为1% ~ 3%的牛血清白蛋白溶液于修饰电极表面，0.5 h后用超纯水冲洗电极表面，4 ^oC冰箱中晾至湿润薄膜状态；

6）滴加6 µL不同浓度水平的PCT标准溶液，4 ^oC恒温孵化4 h后超纯水冲洗电极表面;

7）滴加6 µL二氧化硅/聚多巴胺-银纳米微粒缀连的PCT抗体SiO₂/PDA-Ag NPs-Ab₂的标准溶液，4 ^oC恒温孵化4 h后超纯水冲洗电极表面，制得工作电极，即基于尖晶石型锰铁氧体的夹心型光电化学免疫传感器；

其中，所述尖晶石结构锰铁氧体MnFe₂O₄/Zn_0.1Cd_0.9S，制备步骤如下：

1）将六水合硝酸锰与九水合硝酸铁按摩尔比1:2加入到45 mL超纯水中，搅拌30 min完全溶解，用氢氧化钠调节pH值至10，然后转移至反应釜中160 ~ 180 ^oC下反应12 h;反应结束后，收集产物，离心洗涤，在60 ^oC真空干燥；研磨后得到尖晶石型MnFe₂O4粉末；

2）将乙酸锌与乙酸镉按摩尔比1:9加入到40 mL超纯水中搅拌溶解，搅拌中再缓慢加入40 mL浓度为0.125 mol/L硫化钠溶液，然后在室温下继续搅拌8小时；最后加入已合成的MnFe₂O₄粉末，160 ~ 180 ^oC下反应12小时；反应结束后，收集产物，离心洗涤，在60 ^oC真空干燥过夜得到MnFe₂O₄/Zn_0.1Cd_0.9S粉末，将MnFe₂O₄/Zn_0.1Cd_0.9S粉末分散在水中得到MnFe₂O₄/Zn_0.1Cd_0.9S溶液。

2.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于尖晶石型锰铁氧体的夹心型光电化学免疫传感器，其特征在于，该传感器用于降钙素原（PCT）检测，检测步骤如下：

1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，夹心型光电化学免疫传感器为工作电极，在15 mL、pH 为5.0 ~ 8.0的溶有浓度为0.05 ~ 0.25 mol/L的抗坏血酸的磷酸盐缓冲溶液中进行测试；

2）用时间-电流法对PCT标准溶液进行检测，设置电压为0 V，运行时间120 s，光源波长为400 ~ 500 nm；

3）电极放置好之后，每隔20 s开灯持续照射20 s，记录光电流，绘制工作曲线；

4）用待测的PCT样品溶液代替PCT标准溶液进行检测。