[发明专利]一种基于酪氨酸酶抑制的草甘膦检测体系及SERS检测方法有效
申请号: | 202010485250.4 | 申请日: | 2020-06-01 |
公开(公告)号: | CN111443076B | 公开(公告)日: | 2023-01-20 |
发明(设计)人: | 郑鹭飞;佘永新;马俊;王淼;王静 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 吕纪涛 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 酪氨酸 抑制 草甘膦 检测 体系 sers 方法 | ||
1.一种草甘膦SERS检测方法,其特征在于,所述草甘膦SERS检测方法基于酪氨酸酶抑制的草甘膦检测体系,所述检测体系包括:酪氨酸酶、草甘膦、左旋多巴和PBS缓冲液;
包括以下步骤:(1)利用PBS缓冲液将草甘膦稀释成不同浓度的草甘膦溶液,与左旋多巴和酪氨酸酶混合后孵育3min,得反应混合液;
(2)将所述反应混合液与SERS基底纳米金和硝酸钠溶液混合后,进行SERS测试,以拉曼位移值为1447cm-1处的左旋多巴特征峰的差值作为纵坐标,以草甘膦浓度的对数值为横坐标绘制标准曲线,利用所述标准曲线测算草甘膦浓度。
2.根据权利要求1所述检测方法,其特征在于,步骤(1)中所述PBS缓冲液的摩尔浓度为0.01M,pH值为7.0。
3.根据权利要求1所述检测方法,其特征在于,步骤(1)所述左旋多巴为利用0.01M的PBS缓冲液配制的左旋多巴溶液,所述左旋多巴溶液中左旋多巴的摩尔浓度为0.5mM。
4.根据权利要求3所述检测方法,其特征在于,所述左旋多巴溶液、草甘膦溶液和酪氨酸酶的体积比为150:200:10。
5.根据权利要求1所述检测方法,其特征在于,步骤(1)中还包括空白对照实验,在空白对照实验中所述反应混合液中加入的是相同体积但不含草甘膦的PBS缓冲液,所述PBS缓冲液的摩尔浓度为0.01M,pH值为7.0。
6.根据权利要求4所述检测方法,其特征在于,步骤(2)所述反应混合液与SERS基底纳米金和硝酸钠溶液的体积比为1:50:3;
所述硝酸钠溶液的摩尔浓度为1M。
7.根据权利要求1或6所述检测方法,其特征在于,步骤(2)所述SERS基底纳米金的制备方法,包括:将氯金酸水溶液加热至回流后搅拌,与柠檬酸钠水溶液混合后持续回流搅拌30min,停止加热冷却,得SERS基底纳米金;
所述氯金酸水溶液中的氯金酸和柠檬酸钠水溶液中的柠檬酸钠的质量比为10:7。
8.根据权利要求7所述检测方法,其特征在于,所述氯金酸水溶液的质量百分含量为0.01wt%;所述柠檬酸钠水溶液的质量百分含量为1wt%。
9.根据权利要求1所述检测方法,其特征在于,步骤(2)所述标准曲线为:Y=4733.35X+5651.75,R2=0.9845。
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