[发明专利]一种高效液相色谱法测定金麦草配方颗粒中黄芪甲苷含量的方法

说明书

本发明公开了一种高效液相色谱法测定金麦草配方颗粒中黄芪甲苷含量的方法，包括如下步骤：(1)标准溶液的配置；(2)供试品溶液的制备；(3)液相色谱分离；(4)含量计算方法。本发明样品提取前处理方法简单，有效成分可被充分提取；本发明准确、快速、灵敏度高，各项方法学指标均可满足实际检测的需要，节约时间与成本；本发明被测化合物在标准曲线线性范围内呈良好的线性(R²＞0.9990)；有效成分日内精密度小于1.0％，日间精密度的相对标准偏差均小于3.0％；本发明黄芪甲苷有效成分的回收率在90.0％～110.0％范围内。

技术领域

本发明涉及中药成分分析技术领域，具体涉及一种高效液相色谱法测定金麦草配方颗粒中黄芪甲苷含量的方法。

背景技术

金麦草出自中药经典名方《太平惠民和剂局方》。全方由草石蚕、蛇舌草、金银花、桔梗、黄芪、百合、白术组成，具有宣肺化痰，止咳平喘的功效，是临床上治疗慢性阻塞性肺病常用的疗效确切的中药组方。

中药配方颗粒是近几年发展起来的利用现代生产技术，以中药饮片为原料，加入适宜的辅料，按照一定生产工艺制成，供临床调剂用的新型颗粒状制剂。

中药复方的配伍使原有某些成分发生量的变化或产生新的化合物，从而表现出增效、减毒、或新的药理活性。在中药煎煮过程中，指标成分产生中和、络合、共溶等化学反应，导致含量与比例的变化，进而造成药理功效的改变。因此，配方颗粒有“单味饮片制剂、临证组方”的特点，决定其缺少水煎剂的合煎过程，进而导致指标成分含量、质量评价方法上存在较大差异。另外，配方颗粒在生产的过程中，存在提取、浓缩、干燥、制粒等过程，样品前处理方法也不同于一般的水煎剂。

由于与传统中药水煎工艺差距较大，有效成分含量可能存在较大的差异，金麦草配方颗粒缺少系统规范的有效成分含量测定方法，导致其质量控制缺乏强有力的理论与科研数据支撑，使用范围受到一定的限制，因此，急需建立一种测定金麦草配方颗粒有效成分的方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服背景技术的技术缺陷，提供一种高效液相色谱法测定金麦草配方颗粒中黄芪甲苷含量的方法。本发明旨在建立一种高效液相色谱法测定金麦草配方颗粒中黄芪甲苷含量的方法，为金麦草配方颗粒质量评价提供更好的理论基础；本发明操作简单，结果可靠、灵敏，满足产品快速检测的需要。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下：

一种高效液相色谱法测定金麦草配方颗粒中黄芪甲苷含量的方法，包括样品提取和液相分离两个步骤，对金麦草配方颗粒中的有效成分黄芪甲苷的充分提取和化合物的良好分离，采用赛默飞的C18反相高效液相色谱柱分离，以乙腈-0.15％甲酸溶液为流动相作梯度洗脱(表1)。

一种高效液相色谱法测定金麦草配方颗粒中黄芪甲苷含量的方法，包括如下步骤：

(1)标准溶液的配置：

称取黄芪甲苷的对照品适量，精密称定，加甲醇制成含有黄芪甲苷的对照品溶液作为储备液，密封，避光保存在4℃冷柜中；

(2)供试品溶液的制备：

取干燥的金麦草配方颗粒粉末0.5g，精密称定，置10ml棕色容量瓶中，加入10ml甲醇，室温浸泡1h后超声40min，重复3次，合并提取液并过滤，回收溶剂后用甲醇溶解并转移至25ml棕色容量瓶，定容并摇匀，经微孔滤膜滤过，HPLC分析；

(3)液相色谱分离：

分离色谱柱：赛默飞C18反相高效液相色谱柱(5μm，250mm×4.6mm，Thermo)；

流动相：乙腈(A)-0.15％甲酸(B)，梯度洗脱，见表1；

流速：1.0ml/min；

检测波长：230nm；