[发明专利]一种小麦品种间抗寒性差异的鉴定方法

说明书

本发明公开了一种小麦品种间抗寒性差异的鉴定方法，包括以下步骤：(1)测定经过充分抗寒锻炼的不同品种小麦与抗寒相关的生理生化指标；(2)用隶属函数法对步骤(1)得到的生理生化指标进行综合抗寒性评价，得到样品的抗寒隶属函数值(U_ij)；(3)用每个样品的相对电导率和生理生化指标隶属度的平均值作为各样品抗寒能力综合评判标准并进行比较。本发明的有益效果是：该方法建立了多指标的综合评价函数，与现有的用单一指标或极少数指标评价猕猴桃抗寒性的方法相比，更加准确可靠，适用于不同种、不同品种猕猴桃抗寒性鉴定与评价的技术体系。

技术领域

本发明涉及农业技术领域，具体是一种鉴定和评价小麦抗寒性的方法。

背景技术

小麦冬季冻害、早春冻害(倒春寒)和低温冷害已成为威胁我国小麦生产安全的主要自然灾害。由于小麦品种耐寒能力的强弱是决定冻害发生程度的主要内在因素，因此，准确鉴定小麦品种(系)的抗寒程度，对小麦新品种培育及其推广应用具有重要意义。

目前，小麦品种抗寒性的鉴定方法，主要包括调查大田死苗情况的常规抗寒性鉴定，以及与耐寒性相关的生理生化指标测定等。这些方法的应用，对小麦品种抗寒性鉴定发挥了重要作用，但仍存在一些不足。如常规抗寒性鉴定法，受外界环境温度的影响较大，加之近年来常常出现暖冬天气，既严重影响了抗寒性鉴定的准确性，又不能确切鉴定其抗寒程度；生理生化指标测定法，操作步骤繁杂，所用化学试剂易造成环境污染，而且小麦品种(系)稍有低温胁迫即可引起较大的生理生化变化，而强低温胁迫易造成小麦植株死亡，无法根据测定的有关指标准确确定其耐寒程度。

选育耐寒小麦品种是解决小麦受寒害的主要手段之一，而选育耐寒品种的关键是对耐寒品种的准确鉴定。根据目前现有的小麦品种抗寒性的鉴定方法，主要是依赖受冻后的表型特征进行抗寒分级，但是对于冬季降温程度低或春季发生的倒春寒，由于其受寒害表型特征不明显，则不能对品种的抗寒性进行准确判断。

发明内容

本发明的目的是提供一种鉴定和评价小麦抗寒性的方法，以经过充分抗寒锻炼的不同品种成年小麦生小麦秸秆为鉴定材料，进行生理指标测定，采用主成分分析结合隶属函数法进行小麦抗寒性综合评价，本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种鉴定和评价小麦抗寒性的方法，包括以下步骤：(1)测定经过充分抗寒锻炼的不同品种小麦与抗寒相关的生理生化指标，所述与抗寒相关的生理生化指标为：可溶性糖的测定，脯氨酸的测定，可溶性蛋白质的测定，光吸收率的测定；(2)用隶属函数法对步骤(1)得到的生理生化指标进行综合抗寒性评价，得到样品的抗寒隶属函数值(U_ij)；(3)用每个样品的相对电导率和生理生化指标隶属度的平均值作为各样品抗寒能力综合评判标准并进行比较，隶属度的平均值越大，样品的抗寒性越强；

优选地，步骤(1)中所述小麦选择生长势良好的小麦上部的健康无病虫害小麦秸秆作为鉴定材料，取小麦秸秆时间为1月中旬。

优选地，所述步骤(1)中，采用艺酮比色法测定可溶性糖的含量；采用磺基水杨酸法测量脯氨酸的含量；采用考马斯亮蓝G-250法测量可溶性蛋白质的含量；剪取0.1g叶片，加入3mL质量分数为5％的三氯乙酸溶液研磨，然后再12000g的离心力下离心10min，吸上清作为备用液；测定时取备用液0.2ml与0.4mL的浓度为75mmol/L的NaH2PO4溶液混匀后，在依次加入质量分数为10％的偏磷酸0.4ml、质量分数为44％的2，2磷酸0.4ml，质量分数为4％的2，2二联吡啶0.4ml，和质量分数为3％的FeCI3溶液0.2ml，摇匀，于37℃保温1小时，然后在525nm波长下测定光吸收值。

优选地，上述每个生理指标均重复测定3次，结果取平均值。

优选地，将步骤(2)获得的主成分进行隶属函数值分析，根据隶属函数值和各指标的权重得到不同品种小麦的抗寒性综合评价值D，所述隶属函数值和综合评价的计算公式为：