[发明专利]一种丙腈类化合物在增强溶酶体生成中的应用有效
| 申请号： | 202010488339.6 | 申请日： | 2020-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN111603483B | 公开（公告）日： | 2023-03-14 |
| 发明（设计）人： | 皮会丰;邓平;余争平;张涛 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军军医大学 |
| 主分类号： | A61K35/30 | 分类号： | A61K35/30;A61P25/28;A61K31/515 |
| 代理公司： | 北京元本知识产权代理事务所(普通合伙) 11308 | 代理人： | 黎昌莉 |
| 地址： | 400000 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 丙腈类 化合物 增强 溶酶体 生成 中的 应用 | ||
1.一种运用Ⅰ所示结构式的化合物靶向结合14-3-3β蛋白的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)细胞培养和靶向结合14-3-3β蛋白：Neuro-2a细胞培养基中加入Ⅰ所示结构式的化合物进行预处理；所述化合物的摩尔浓度范围为10μM-40μM；
(2)检测Ⅰ所示结构式的化合物靶向结合14-3-3β蛋白情况及靶向结合14-3-3β蛋白的区域。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述化合物的摩尔浓度为40μM。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述化合物的预处理时间大于2小时。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶向结合14-3-3β蛋白的区域为TYR130、ASP126、ASN175、LYS122、SER47。
5.一种运用Ⅰ所示结构式的化合物阻断Aβ25-35诱导神经毒性的方法，其特征在于，步骤如下：
(1)细胞培养和阻断诱导神经毒性：Neuro-2a细胞培养基中加入Ⅰ所示结构式的化合物进行预处理，再混入诱导神经毒性的Aβ25-35；所述化合物的摩尔浓度范围为10μM-40μM；
(2)检测细胞增殖和死亡情况。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述Aβ25-35的摩尔浓度为100μM。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述化合物的摩尔浓度为40μM。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述化合物的预处理时间大于2小时。
9.一种运用Ⅰ所示结构式的化合物抑制TFEB蛋白与YWHA/14-3-3蛋白结合的方法，其特征在于，步骤如下：
(1)细胞培养和增强TFEB蛋白与YWHA/14-3-3蛋白结合：Neuro-2a细胞培养基中加入Ⅰ所示结构式的化合物进行预处理，再混入诱导神经毒性的Aβ25-35；所述化合物的摩尔浓度范围为10μM-40μM；
(2)检测TFEBTFEB-YWHA/14-3-3结合情况。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述Aβ25-35的摩尔浓度为100μM。
11.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述化合物的摩尔浓度为40μM。
12.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述化合物的预处理时间大于2小时。
13.一种运用Ⅰ所示结构式的化合物诱导TFEB核转位的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)细胞培养和抑制TFEB核表达：Neuro-2a细胞培养基中加入Ⅰ所示结构式的化合物进行预处理，再混入抑制TFEB核表达的Aβ25-35；所述化合物的摩尔浓度范围为10μM-40μM；
(2)检测TFEB核转位情况。
14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，所述Aβ25-35的摩尔浓度为100μM。
15.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，所述化合物的摩尔浓度为40μM。
16.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，所述化合物的预处理时间大于2小时。
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