[发明专利]一种丁酸梭菌的快速筛选方法

权利要求书

1.一种筛选丁酸梭菌的平板分离初筛培养基，其特征在于，包括以下质量百分含量的组分：蛋白胨8％-12％、酵母浸粉8％-12％、葡萄糖0.5％-1％、NaCl 2％-7％、溴甲酚绿0.5％-0.7％、琼脂1.3％-1.6％和余量的水。

2.一种筛选丁酸梭菌的平板分离初筛方法，其特征在于，包括以下步骤：

将活化后的丁酸梭菌菌株种子液涂布于权利要求1所述的平板分离初筛培养基中，于35℃-37℃厌氧培养24-48h，测量平板分离初筛培养基上单菌落产生的变色圈直径，变色圈直径≥0.5cm的单菌落即为初筛合格的丁酸梭菌。

3.一种丁酸梭菌的快速筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将权利要求2中初筛合格的丁酸梭菌进行孔板复筛得到丁酸梭菌的种子液，检测所得种子液的丁酸含量；

(2)选取步骤(1)中丁酸含量较原始初筛合格的丁酸梭菌提升≥5％的菌株作为复筛优株进行试管斜面培养和摇瓶培养，检测摇瓶培养后所得种子液的丁酸含量；摇瓶培养后所得种子液中较复筛优株丁酸含量提升≥5％的菌株即为筛选得到的丁酸梭菌。

4.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，所述孔板复筛包括96孔板厌氧培养和48孔板厌氧培养；所述96孔板厌氧培养时间为12-17h；所述48孔板厌氧培养时间为24-48h。

5.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，所述试管斜面培养为厌氧培养；所述厌氧培养的温度为35℃-37℃，所述厌氧培养的时间为24-48h。

6.根据权利要求5所述的筛选方法，其特征在于，所述试管斜面培养的培养基，以水为溶剂，包括以下组分：蛋白胨8-12g/L、酵母浸粉8-12g/L、葡萄糖0.5-1g/L、NaCl 2-7g/L、琼脂1.3-1.6g/L。

7.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，所述摇瓶培养包括摇瓶液体种子培养和摇瓶液体发酵培养。

8.根据权利要求7所述的筛选方法，其特征在于，所述摇瓶培养的温度为35℃-37℃。

9.根据权利要求7所述的筛选方法，其特征在于，所述摇瓶液体种子培养的培养基，以水为溶剂，包括以下组分：蛋白胨8-12g/L、酵母浸粉8-12g/L、葡萄糖5-8g/L、NaCl 2-7g/L；所述摇瓶液体发酵培养的培养基，以水为溶剂，包括以下组分：蛋白胨8-12g/L、酵母浸粉8-12g/L、葡萄糖10-12g/L、NaCl 2-7g/L。

10.根据权利要求7所述的筛选方法，其特征在于，所述摇瓶液体种子培养的时间为12-17h；所述摇瓶液体发酵培养的时间为24-48h。