[发明专利]一种抗CD19的纳米抗体、编码基因、重组纳米抗体、重组载体、重组菌株和应用

说明书

本发明提供了一种抗CD19的纳米抗体、编码基因、重组纳米抗体、重组载体、重组菌株和应用，属于免疫学技术领域，本发明提供的所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；本发明所述重组纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明提供的所述抗CD19的重组纳米抗体由包括驼源的纳米抗体基因和人IgG Fc段基因融合表达，能够利用所述重组菌株进行稳定表达，并能够特异性识别CD19抗原。

技术领域

本发明属于免疫学技术领域，尤其涉及一种抗CD19的纳米抗体、编码基因、重组载体、重组菌株和应用。

背景技术

骆驼科动物体内存在一种天然缺失轻链的抗体，即重链抗体。该抗体只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的重链恒定区CH2和CH3区，它不像人工改造的单链抗体片段容易相互沾粘，甚至聚集成块。单独克隆并表达出的VHH(variable domain ofheavy-chainantibody,VHH)结构具有与原重链抗体相当的结构稳定性以及与抗原的结合活性，是目前已知的可结合目标抗原的最小单位。其分子量只有15KD，结构直径2.5nm，长4nm，是普通IgG的十几分之一，所以称为纳米抗体(nanobody,Nb)。纳米抗体由4个保守序列和3个互补决定区组成，且有较长的CDR1和CDR3区，使其有稳定的结构。较长的CDR3区凸出的环状结构，使纳米抗体与抗原有很高的结合力。纳米抗体有高的亲水性，并且由于VHH片段与人的VH序列具有高度同源性，具有较低的免疫原性，可以对其进行人源化改造和修饰。纳米抗体可以在原核细胞和真核细胞中高效表达。纳米抗体还具有独特的理化性质，在部分高温、酸性等极端条件下依然可以维持活性，纳米抗体具有良好的组织穿透能力。基于以上优点，纳米抗体在一些疾病的诊断和治疗中具有广阔的应用前景。

人白细胞分化抗原19(CD19)分子是B淋巴细胞表面的跨膜蛋白，对 B细胞的活化、信号传导和生长调节具有重要的作用，是一种功能受体分子。 CD19在B淋巴细胞系统的恶性肿瘤中广泛表达。例如：多数急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病和B细胞淋巴瘤。在对过敏性紫癜病因的研究中发现，检测过敏性紫癜性肾炎患儿外周血淋巴细胞CD19发现，其表达率较高。同时，在肝硬化患者外周血中CD19的细胞表达水平能反应患者的肝脏损伤程度。