[发明专利]一种抗艰难梭菌肠毒素A的抗体

说明书

本申请属于抗体制备技术领域，具体涉及一种抗艰难梭菌肠毒素A的抗体。该抗体为结合艰难梭菌毒素A的全人源抗体，由人源轻链可变区VL和重链可变区VH构成。基于现有噬菌体抗体库技术的成熟发展，本申请筛选获得了一个对艰难梭菌毒素A(TcdA)有很高的亲和力、在噬菌体表面展示的抗体序列，进一步获得了对应的ScFv‑Fc抗体。初步实验验证表明，所获得艰难梭菌毒素A(TcdA)ScFv‑Fc抗体可以特异性的识别并结合艰难梭菌毒素A(TcdA)，而利用该抗体，可为艰难梭菌毒素A(TcdA)的检测、相关疾病治疗药物筛选、药物开发奠定一定技术基础，因此具有较好的应用开发价值。

技术领域

本申请属于抗体制备技术领域，具体涉及一种抗艰难梭菌肠毒素A的抗体。

背景技术

艰难梭菌（Clostridium difficile）是一种专性厌氧的革兰阳性菌，该菌对氧气十分敏感，因很难从标本中分离培养而得名。艰难梭菌属于一种正常的肠道菌群，但在患者出现肠道菌群失调时，能够引起艰难梭菌感染进而引发疾病。艰难梭菌感染是一种由产毒型艰难梭菌在肠道过度增殖并大量释放毒素引起的感染性疾病，轻可引起腹泻，重则导致爆发性伪膜性肠炎，甚至死亡。

艰难梭菌主要产生2种大分子梭菌毒素：肠毒素A（TcdA）和细胞毒素B（TcdB），此外还有二元毒素(CDT)。肠毒素A（TcdA）和细胞毒素B（TcdB），两者均能灭活GTP结合蛋白，引发一系列反应最终导致腹泻和肠炎。研究表明，肠毒素A（TcdA）容易使肠壁的中性粒细胞浸润，释放淋巴因子，引起机体液体大量分泌和出血性坏死。

由于肠毒素A对人体的潜在危害性，由此如能开发一种针对肠毒素A（TcdA）的抗体，则可为相关疾病的诊断和治疗奠定良好的技术基础。

发明内容

本申请主要目的在于提供一种针对肠毒素A（TcdA）的抗体，从而可为相关疾病的诊断和治疗奠定一定技术基础。

本申请所采取的技术方案详述如下。

抗艰难梭菌肠毒素A的抗体，该抗体为结合艰难梭菌毒素A(TcdA)的全人源抗体，由人源轻链可变区VL和重链可变区VH构成；

所述轻链可变区VL，长度为339bp，碱基序列如SEQ ID NO.1所示，具体为：

GAGCTCGTGATGACTCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGAGTGTTTTATGGAACTCCAATAATAAGAATTACTTAGCTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAGGCTGCTCATTCACTGGGCATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAACAATATTATAGTATTCCGGTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA

轻链可变区VL所编码氨基酸序列，由113个氨基酸组成，氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示；具体为：

ELVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLWNSNNKNYLAWYQQKPGQPPRLLIHWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSIPVTFGPGTKVDIK

该轻链可变区VL含有三个高变区，对应碱基序列分别为：

79~114位处的：CAGAGTGTTTTATGGAACTCCAATAATAAGAATTAC（对应编码氨基酸序列为：QSVLWNSNNKNY）；

166~174位处的：TGGGCATCT（对应编码氨基酸序列为：WAS）；