[发明专利]一种与猪肌纤维类型相关的lncRNA标志物及其应用有效
申请号: | 202010496135.7 | 申请日: | 2020-06-03 |
公开(公告)号: | CN111662988B | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 孙加节;张永亮;江青艳;习欠云;陈婷;罗君谊 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 崔红丽 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肌纤维 类型 相关 lncrna 标志 及其 应用 | ||
1.一种与猪肉肌纤维类型相关的lncRNA标志物的检测引物,其特征在于,所述的lncRNA标志物为LincRNA-ROMT,其序列如SEQ ID NO:1所示;
所述检测引物为:
LincRNA-ROMT的上游引物序列为:5′-TTGGACACCTGGGCTTGGATAAT-3′;
LincRNA-ROMT的下游引物序列为:5′-TCTGGCAGAGTGGGTTGGATGAG-3′。
2.权利要求1所述的检测引物在遗传标记辅助氧化型肌纤维类型猪和/或酵解型肌纤维类型猪育种中的应用,其特征在于:
权利要求1中所述的LincRNA-ROMT在氧化型肌纤维类型猪肌肉组织中低表达,在酵解型肌纤维类型猪肌肉组织中高表达。
3.权利要求1所述的检测引物在制备遗传标记辅助氧化型肌纤维类型猪和/或酵解型肌纤维类型猪育种的试剂盒中的应用,其特征在于:
权利要求1中所述的LincRNA-ROMT在氧化型肌纤维类型猪肌肉组织中低表达,在酵解型肌纤维类型猪肌肉组织中高表达。
4.一种检测与猪肉肌纤维类型相关的lncRNA标志物的试剂盒,其特征在于含有权利要求1所述的lncRNA标志物的检测引物;
所述的lncRNA标志物为LincRNA-ROMT,其序列如SEQ ID NO:1所示。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于:
所述的试剂盒还含有针对所述LincRNA-ROMT的反转录试剂、特异性引物、内参引物、荧光定量PCR反应液。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:
所述的内参引物包括GAPDH内参基因的上游引物和下游引物,上游引物序列为SEQ IDNO:4,下游引物序列为 SEQ ID NO:5。
7.权利要求4~6任一项所述的试剂盒在猪肌肉组织中LincRNA-ROMT的定量检测中的应用,其特征在于:
所述的LincRNA-ROMT的序列如SEQ ID NO:1所示。
8.一种检测与猪肉肌纤维类型相关的lncRNA标志物的方法,其特征在于,所述的lncRNA标志物为LincRNA-ROMT,其序列如SEQ ID NO:1所示;
所述方法包括如下步骤:
1)提取猪肌肉组织总RNA;
2)通过反转录随机引物在反转录酶的作用下将LincRNA-ROMT反转录成cDNA;
3)采用权利要求1所述的检测引物在荧光实时定量PCR仪上将步骤2)获得的cDNA进行扩增检测;
4)通过溶解曲线分析,2-ΔΔCt法进行相对定量。
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