[发明专利]丹参ERF-Ⅶ转录因子SmERF73及其应用

说明书

本发明公开了一种一种参与二萜生物合成调控的丹参ERF‑Ⅶ转录因子SmERF73及其应用。本发明保护氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质及其编码基因。本发明还保护所述蛋白质作为转录因子及其在丹参酮产量提高中的应用。本发明对于丹参酮产量的提高具有重要的理论意义，并为药用植物次生代谢物生物合成调控的分子机制提供理论和技术支撑。

技术领域

本发明涉及一种参与二萜生物合成调控的丹参ERF-Ⅶ转录因子SmERF73及其应用。

背景技术

丹参酮是我国中药丹参中含有的一组二萜类天然产物，其在心血管疾病的临床治疗中有着显著的疗效，但其生物合成的调控机制研究尚为匮乏。因此，在丹参酮生物合成途径较为清晰的情况下，研究丹参酮生物合成的调控机制对于丹参酮产量的提高具有重要的理论意义，并为药用植物次生代谢物生物合成调控的分子机制提供理论和技术支撑。

ERF转录因子在多种药用植物中具有着调控活性成分(如长春花碱，倍半萜青蒿素、二萜紫杉醇等)生物合成的功能。但这些ERF都属于ERF亚家族的第IX组，其中参与低氧胁迫的第VII组ERF尚未见调控次生代谢物生合成的报道。JA信号途径中的阻遏蛋白JAZ可以通过与MYB和bHLH家族转录因子的相互作用，进而介导下游基因的表达，但是与ERF间的相互作用鲜有报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种参与二萜生物合成调控的丹参ERF-Ⅶ转录因子SmERF73及其应用。

第一方面，本发明保护蛋白质，为如下(A1)-(A4)中的任一种；

(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质；

(A2)将(A1)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

(A3)与(A1)-(A2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；

(A4)在(A1)-(A3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接蛋白标签后得到的融合蛋白。

上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述蛋白质中，蛋白标签(protein-tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。

第二方面，本发明保护编码所述蛋白质的基因。

所述基因为如下(B1)-(B3)中任一所述的DNA分子：

(B1)SEQ ID No.1所示的DNA分子；

(B2)在严格条件下与(B1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能蛋白的DNA分子；

(B3)与(B1)或(B2)限定的DNA序列具有90％以上同一性且编码具有相同功能蛋白的DNA分子。

所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。

这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本发明的SEQ ID No.1的核苷酸序列具有90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。

第三方面，本发明保护含有所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。