[发明专利]烟草NtDREB-1BL1转录因子及其应用

权利要求书

1.烟草NtDREB-1BL1转录因子在烟草色素调节中的应用，其特征在于，该转录因子定位于烟草叶片细胞的细胞核内，通过与烟草内NtPSY基因上游启动子序列结合来实现对烟草内NtPSY基因表达量的调控，从而影响叶片内色素类物质含量变化；并且所述烟草NtDREB-1BL1转录因子表达量与色素类物质含量呈现正相关关系；

所述色素类物质为叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素；

所述烟草NtDREB-1BL1转录因子的CDS碱基序列如SEQ ID No.1所示。

2.利用烟草NtDREB-1BL1转录因子的烟草新品种培育方法，其特征在于，通过构建重组载体，并转化烟草后，筛选获得色素类物质含量明显变化的烟草新品种；

所述烟草NtDREB-1BL1转录因子表达量与色素类物质含量呈现正相关关系；

所述色素类物质为叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素；

所述烟草NtDREB-1BL1转录因子的CDS碱基序列如SEQ ID No.1所示；

所述重组载体包括利用VIGS技术构建的基因沉默载体pTRV2-DREBL1；采用超表达技术结合Sup1300-GFP载体构建的超表达重组载体Sup1300-DREBL1-OE；利用RNAi技术构建的RNAi-DREBL1；具体构建时，

构建基因沉默载体pTRV2-DREBL1，扩增保守区域时，具体引物序列如下：

TRV-DREB1-F：5’-CGGGATCCGGACCCACTTGCTGAATATT-3’，

TRV-DREB1-R：5’- GCGGTACCTAACATTAGTCCTTCTGCCAT-3’；

构建超表达重组载体Sup1300-DREBL1-OE时，引物序列设计如下：

DREBL1-OE-F：5‘-GCTCTAGAATGGATATCTTTAGAAGCTATTATTC-3’，

DREBL1-OE-R：5‘-GGTACCGATAGAATAACTCCACAAAGGC-3’；

构建RNAi载体RNAi-DREBL1时，设计RNAi载体引物序列如下：

DREBL1-RNAi-attB-F：

5’-GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTGCTATTATTCGGACCCACTTGC-3’，

共用RNAi-attB-R：

5’-GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTAGAACGGCCCCTTAATGCAAT-3’。