[发明专利]生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的谷氨酸棒杆菌及其改造方法和应用

权利要求书

1.一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法，其特征在于：对谷氨酸棒杆菌基因组进行改造，在argR基因中插入大肠杆菌的argB_Ec基因。

2.根据权利要求1所述的一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法，其特征在于：采用PCR扩增argR基因上游片段argR_F、argR基因下游片段argR_R和argB_Ec基因获得argR_F-argB_Ec-argR_R基因片段。

3.根据权利要求2所述的一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)以argR_F基因和argB_Ec基因混合物为模板，利用引物argRF1和argB_EcR重叠延伸PCR扩增获得argR_F-argB_Ec基因片段；

(2)以argR_F-argB_Ec基因和argR_R基因混合物为模板，利用引物argRF1和argRR2重叠延伸PCR扩增获得argR_F-argB_Ec-argR_R基因片段。

4.根据权利要求3所述的一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法，其特征在于：所述引物argRF1序列如SEQ ID NO.3所示。

5.根据权利要求3所述的一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法，其特征在于：所述引物argRR2序列如SEQ ID NO.6所示。

6.根据权利要求3所述的一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法，其特征在于：所述引物argB_EcR序列如SEQ ID NO.8所示。

7.根据权利要求1所述的一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法，其特征在于：所述大肠杆菌选用E.coli BL21菌株，所述argB_Ec基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。

8.一种生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的谷氨酸棒杆菌，其特征在于：根据权利要求1-7任一项所述的一种改造谷氨酸棒杆菌生产L-瓜氨酸和L-精氨酸的方法获得的菌株。

9.应用权利要求8所述谷氨酸棒杆菌同时生产L-瓜氨酸和L-精氨酸。