[发明专利]一种用离子转运蛋白促进谷氨酸棒杆菌合成氨基酸的方法有效
申请号: | 202010501734.3 | 申请日: | 2020-06-04 |
公开(公告)号: | CN111718882B | 公开(公告)日: | 2022-06-10 |
发明(设计)人: | 饶志明;徐美娟;刘晶;杨套伟;张显 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P13/14;C12P13/10;C12R1/15 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇钰莹 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 离子 转运 蛋白 促进 谷氨酸 杆菌 合成 氨基酸 方法 | ||
1.一种重组菌,其特征在于,所述重组菌过表达功能性摄钾蛋白CglK和阳离子转运ATP酶CTAP;所述CglK的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述CTAP的氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示,所述重组菌以保藏编号为CCTCC NO:M 2013418的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G01为宿主,所述重组菌以pDXW-10为表达载体。
2.一种提高棒杆菌氨基酸产量的方法,其特征在于,在保藏编号为CCTCC NO:M2013418的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G01中过表达功能性摄钾蛋白CglK和阳离子转运ATP酶CTAP,生产L-谷氨酸;编码所述功能性摄钾蛋白CglK的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码所述阳离子转运ATP酶CTAP的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,将OD600为20~30的重组菌以5~15%的添加量接入发酵体系,发酵温度为25~35℃,pH值为6.5~7.5。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述发酵液中含有葡萄糖50~70g/L,酵母浸粉5~10g/L,K3PO4 3~4g/L,MgSO4·7H2O 0.1~1g/L,(NH4)2SO4 10~25g/L,FeSO4·7H2O0.01~0.05g/L,MnSO4·H2O 0.01~0.05g/L。
5.权利要求1所述重组菌,或权利要求2~4任一所述方法在生产L-谷氨酸的产品中的应用。
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