[发明专利]一种诊断试剂盒及诊断方法

权利要求书

1.一种诊断试剂盒，其特征在于：其组成成分为：抗苗勒管激素(AMH)、辅助生殖(ART)、卵巢颗粒细胞瘤(GCT)和窦卵泡数(AFC)。

2.根据权利要求1所述的一种诊断试剂盒及诊断方法，其特征在于：所述抗苗勒管激素(AMH)是转化生长因子β超家族的成员之一，由募集的窦前卵泡和小窦卵泡的颗粒细胞产生。

3.根据权利要求1所述的一种诊断试剂盒及诊断方法，其特征在于：所述AMH血清水平与窦卵泡数(AFC)相当，是预测卵巢反应性的敏感性和特异性最佳指标，有助于临床为IVF-ET治疗制定患者的个性化COH(有控制性超促排卵)方案，各指标对卵巢低反应的预测价值：AMH＞AFC＞Age＞FSH/LH＞bFSH；各指标对卵巢过度刺激的预测价值：AMH＞AFC＞FSH/LH＞bFSH＞bLH。

4.根据权利要求1所述的一种诊断试剂盒及诊断方法，其特征在于：所述卵巢颗粒细胞瘤(GCT)为最常见的一种具有内分泌(以雌激素为主)功能的卵巢肿瘤，占全部卵巢肿瘤的1～2％，据上海医科大学等统计，平均发病年龄为52岁，60％在绝经期后，青春期前者＜5％。一般正常绝经后妇女不表达AMH；90％成人型GCT的AMH表达呈高水平，(6.8ng/ml-117.9ng/ml)因此AMH可作为成人型GCT的肿瘤标记物。

5.根据权利要求1-4所述的一种诊断试剂盒，其特征在于：其诊断方法如下：

步骤一、卵巢储备检测：

分别采用AMH、FSH+E2和AFC对卵巢进行检测，检测得出：高FSH与卵巢刺激低反应有相关性；月经周期内/间检测值稳定低AMH值与卵巢刺激低反应有相关性；采用AFC对卵巢进行检测时阴超检测可见卵泡细胞(2-10mm)，月经周期第2-5天检测，窦卵泡数与卵巢刺激反应有相关性。

步骤二、AMH与多囊卵巢综合征(PCOS)：

通过AMH对患有PCOS患者进行检测，检测的PCOS患者血清中AMH的统计表格如图1，通过检测结果得知，PCOS影响6％-12％的育龄女性,此病患者卵巢中有大量生长期卵泡，血清AMH显著增高，PCOS患者血清中高AMH水平会降低卵泡对FSH的敏感性，从而影响卵泡的周期募集，因而造成无优势卵泡出现和不排卵，血清AMH每升高1ng/ml，其发生PCOS的风险增加1.27倍；对于AMH与原发性卵巢功能不全(POI)患者和卵巢早衰(POF)患者检测的表格如1-2，POI或POF是指40岁前发生的卵巢常规机能缺失，POI患者的AMH值很低或难以测出，11％POF患者的FSH水平并没有超过40IU/L诊断界值，(AMH最低检测浓度：0.01ng/ml绝经参考浓度：0.086ng/ml)；

步骤三、AMH和年龄用于预测绝经：

对25-50岁的女性检测AMH的含量进行检测，并进行数据统计得到分布图为1-3，由此90％的女性在45岁之后停经，一般女性的停经年龄大约在45-55岁，过早或过晚的绝经对于骨质疏松、心血管疾病、乳腺癌等的患病几率会大大增加。

步骤四、AMH和癌症术后生育力保留：对患有癌症的患者分别进行手术前和手术后进行AMH检测：

1、治疗前AMH检测：较FSH和年龄更好的预测卵巢功能；帮助患者与医生更好的沟通选择辅助治疗方案及个体化保留生育功能策略。

2、治疗后AMH检测：帮助预测生育能力(如青春期前儿童)，帮助选择合适的辅助激素治疗，帮助评估不同化疗方案的毒副作用。

步骤五、AMH与儿童性腺疾病诊断和鉴别诊断：诊断分布图如图4；

1、鉴别诊断性别发育异常患者(DSD)：图中阴影区域代表了正常AMH水平。在LCD(睾丸间质细胞缺陷),CAIS(完全雄性激素不敏感综合征),PAIS(部分雄激素不敏感综合征)患者AMH浓度显著高于正常范围。而在PTD(部分睾丸发育不全)、CGD(完全性腺发育不全)、TH(真正的雌雄同体人)患者的AMH浓度显著低于正常范围，AMH可用于儿科性腺疾病的诊断和鉴别诊断。

2、是否存在睾丸组织：AMH浓度可区分隐睾症和无睾症：若Sertoli细胞功能正常，那么AMH的含量是在正常范围内。在生殖器无法辨认时若出现异常的外生殖器，且有隐睾症的症状，AMH可以帮助确定是隐睾症还是无睾症：无睾症病人体内AMH浓度极低甚至基本为0；隐睾症的话，因为仍然存在睾丸组织，双边隐睾症的患者体内AMH的浓度可以检测到，并与性腺的功能损伤程度相关。

步骤六、得到检测结果：统计表格如图5

正常女性血清AMH水平参考范围如图5，AMH的参考范围反应的是卵巢储备功能的状况，研究对象是各年龄段月经正常的女性，并且排除PCOS的患者，1.其值较低则预示卵巢储备下降及卵巢低反应；AMH水平过低时，应慎重考虑进行IVF；2.其值高则预示卵巢储备功能尚可或多囊卵巢综合症患者，具体情况请结合临床症状判断，3.儿童目前暂无确切的参考范围，可考虑此科研方向。