[发明专利]调控植物耐盐性的狗牙根转录因子CdWRKY50及其应用

权利要求书

1.一种调控植物耐盐性的狗牙根转录因子CdWRKY50，其特征在于：

核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，编码的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。

2.按权利要求1所述调控植物耐盐性的狗牙根转录因子CdWRKY50的应用，其特征在于：

①获得耐盐性下降的转基因拟南芥的应用；

②通过VIGS技术获得耐盐性提高的CdWRKY50沉默狗牙根的应用。

3.按权利要求2所述狗牙根转录因子CdWRKY50的应用，其特征在于所述的步骤①获得耐盐性下降的转基因拟南芥的应用包括以下步骤：

A、构建35S::CdWRKY50过表达载体：将CdWRKY50基因的ORF克隆至带有35S强启动子的植物表达载体中；

B、转化农杆菌：将构建好的35S::CdWRKY50过表达载体通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101；

C、获得过表达CdWRKY50的转基因拟南芥：通过浸花法将CdWRKY50插入拟南芥染色体，通过抗性筛选和表达量鉴定获得过表达CdWRKY50的转基因拟南芥纯合系；

D、转基因拟南芥耐盐性鉴定：以过表达CdWRKY50的转基因拟南芥纯合系为材料，检测分析其在盐胁迫条件下生理指标变化，结果显示，与野生型拟南芥相比，转基因拟南芥的耐盐性下降。

4.按权利要求2所述狗牙根转录因子CdWRKY50的应用，其特征在于所述的步骤②通过VIGS技术获得耐盐性提高的CdWRKY50沉默狗牙根的应用包括以下步骤：

a、构建pCa-γbLIC-CdWRKY50载体：将CdWRKY50基因的特异片段250bp连接至pCa-γbLIC载体中；

b、转化农杆菌：将pCaBS-α、pCaBS-β、pCa-γbLIC-CdWRKY50质粒分别转化农杆菌EHA105；

c、获得CdWRKY50沉默的狗牙根植株：含有pCaBS-α、pCaBS-β、pCa-γbLIC-CdWRKY50质粒的EHA105等量混合后注射烟草叶片，将注射的烟草研磨

液摩擦接种狗牙根叶片，获得CdWRKY50沉默的狗牙根植株；

d、CdWRKY50沉默的狗牙根植株耐盐性鉴定：以CdWRKY50沉默狗牙根为材料，检测分析其在盐胁迫条件下的生理指标变化，结果显示CdWRKY50的沉默提高了狗牙根的耐盐性。