[发明专利]基于金簇和金纳米颗粒的荧光阵列传感器及其制备方法及应用

权利要求书

1.一种利用基于金簇和金纳米颗粒的荧光阵列传感器分析检测维生素B6、B9、B12的方法，所述荧光阵列传感器包括表面带负电的金纳米簇、以及带正电的半胱氨酸修饰的金纳米颗粒和柠檬酸-三聚氰胺修饰的金纳米颗粒，

所述方法包括以下步骤：

步骤1、制备金纳米簇：将5.0mL浓度为10mmol/L的HAuCl₄溶液加入到5.0mL浓度为50mg/mL的牛血清蛋白溶液中，在37℃下剧烈搅拌2分钟，将0.5mL浓度为1mol/L的NaOH溶液快速加入反应液当中，在37℃下剧烈搅拌12小时，得到金纳米簇溶液；

步骤2、制备半胱氨酸修饰的金纳米颗粒：将500μL浓度为215mmol/L的半胱氨酸溶液和2.23 mL浓度为25.5mmol/L的 HAuCl₄溶液混合均匀，加入37.5 mL蒸馏水，室温下搅拌20分钟，然后加入10μL浓度为10mmol/L的NaBH₄溶液，室温下快速搅拌40分钟，溶液逐渐变为深红色，得到所述半胱氨酸修饰的金纳米颗粒；

步骤3、制备柠檬酸-三聚氰胺修饰的金纳米颗粒：将100mL质量浓度为0.01% 的HAuCl₄溶液冷凝回流，加热至沸腾状态，然后加入5mL质量浓度为1%的柠檬酸溶液，当溶液变为酒红色后，继续沸腾15分钟，得到柠檬酸修饰的金纳米颗粒，按所述柠檬酸修饰的金纳米颗粒和三聚氰胺20:1的质量浓度混合，孵育10分钟，得到所述柠檬酸-三聚氰胺修饰的金纳米颗粒；

步骤4、分别取500mL的三种维生素B6、B9、B12溶液分别加入到500μL步骤2和步骤3制备的两种金纳米颗粒溶液中，混合均匀后用10 .0mmol/L的pH为8 .0的Tris缓冲液定容至2.0mL，在室温下充分混合10分钟；取500μL反应液，各加入100μL的金纳米簇溶液，混合均匀后用10 .0mmol/L的pH为8 .0的Tris缓冲液定容至2 .0mL，在室温下充分混合15分钟；选用505nm作为激发波长，使用荧光光谱仪准确记录体系溶液从550-800nm波长范围内的荧光发射光谱变化情况；由牛血清蛋白作为模板合成的金纳米簇表面带负电，半胱氨酸修饰的金纳米粒子、柠檬酸-三聚氰胺修饰的金纳米颗粒均带正电，由于静电作用，金簇被吸附至金纳米颗粒，从而荧光猝灭，而三种维生素B分子均呈电负性，可诱导半胱氨酸修饰的金纳米粒子和柠檬酸-三聚氰胺修饰的金纳米颗粒聚沉，导致半胱氨酸修饰的金纳米粒子、柠檬酸-三聚氰胺修饰的金纳米颗粒与金纳米簇之间的静电作用降低，使得体系荧光恢复，但恢复程度不同，不同的荧光信号响应使得该阵列传感器实现对三种分析物的识别。